Question

我国饮用水卫生标准规定每毫升水样中细菌总数不得大于100个，大肠杆菌不得检出。某兴趣小组为检测本地自来水中的细菌总数和是否有大肠杆菌，进行了如下实验：

①分别配制营养琼脂培养基（成分：牛肉膏、蛋白胨、NaCl、琼脂、水）和伊红美蓝培养基（成分：蛋白胨、NaCl、琼脂、乳糖、伊红、美蓝、水），灭菌

②取水样

③先测定甲项指标：用灭菌吸管吸取1mL水样，涂布到营养琼脂培养基中；置于37℃培养24h后进行菌落计数。另设一个空白对照组。

④用滤膜法测定乙项指标，装置和操作如图

回答下列问题：

（1）步骤②取水样前为了对自来水龙头灭菌，应对它作____________________________处理。

（2）步骚③测定的指标甲是____________________________。水样涂布前无需稀释，原因可能是____________________________________。步骤③中的空白对照组应是：____________________________________。

（3）步骚①测定乙项指标，主要观察滤膜上是否会出现_________色菌落。

（4）兴趣小组认为合格的自来水中细菌数量很少，担心检测不到，因而将取得的水样先加入到无琼脂的营养培养液中培养一段时间后，再稀释涂布平板计数。这样操作获得的数据_________（填“可信”或“不可信”）。理由是____________________________________。

Answer

火焰灼烧一段时间 1 mL水样中的细菌总数 自来水中细菌数量很少 1mL水样换成等量无菌水，其它条件完全相同（答蒸馏水不给分） 黑 不可信 细菌会在营养培养液中大量繁殖，其数量不能真实反映水样中原有的数量

【解析】

由题干信息分析可知，本实验的实验目的是检测本地自来水中的细菌总数和是否有大肠杆菌，大肠杆菌的鉴定常采用伊红美蓝作为指示剂，这是因为伊红为酸性染料，美蓝为碱性染料；大肠杆菌在伊红-美蓝作为指示剂添加到的培养基中进行培养，大肠杆菌的菌落会呈深紫色（黑色），并有金属光泽。

（1）步骤②取水样前为了对自来水龙头灭菌，应对它作火焰灼烧一段时间处理。

（2）由题干信息“用灭菌吸管吸取1 mL水样，涂布到营养琼脂培养基中；置于37℃培养24h后进行菌落计数”分析可知，该步骤是进行菌落计数的，故步骤③测定的指标甲是1mL水样中的细菌总数；水样涂布前无需稀释，原因可能是自来水中细菌数量很少；步骤③中的空白对照组应是：1mL水样换成等量无菌水，其它条件完全相同。

（3）步骤④测定乙项指标，主要观察滤膜上是否会出现黑色菌落。

（4）兴趣小组认为合格的自来水中细菌数量很少，担心检测不到，因而将取得的水样先加入到无琼脂的营养培养液中培养一段时间后，再稀释涂布平板计数，这样操作获得的数据不可信；因为细菌会在营养培养液中大量繁殖，其数量不能真实反映水样中原有的数量。