Question

人类在预防与诊疗传染性疾病过程中，经常使用疫苗和抗体。下图为A型流感病毒PB1蛋白单克隆抗体的制备部分过程，请回答：

（1）若要在体外获得大量的PB1基因，常采用_________技术进行扩增。

（2）限制酶BamH I的识别序列和切点是－G↓GATCC－，在构建PB1基因表达载体过程中，所用的载体质粒上有该酶的一个切点。一个质粒分子经Bam H I切割前后，分别含有_______、_________个游离的磷酸基团。质粒被限制酶Bam H I切割后所形成的黏性末端是_______。

（3）过程④所用的促融方法是_________，获得的X是_________。

（4）单克隆抗体与常规的血清抗体相比，最大的优越性是_________。

（5）对该传染病疑似患者确诊时，可以用图中的_________进行特异性结合检测。

Answer

PCR 0 2 -CTAG或GATC- 灭活的病毒或PEG诱导 杂交瘤细胞 特异性强、灵敏度高，并可大量制备 抗PBI蛋白的单克隆抗体

【解析】

分析题图：图示为疫苗生产和抗体制备的流程之一，其中①表示逆转录过程；②是获取目的基因（A基因）的过程；③是表达载体导入朱提细胞，④是细胞融合过程；X为杂交瘤细胞。

（1）要在体外获得大量的PB1基因，常采用PCR技术进行扩增。

（2）质粒是环状DNA分子，切割前不含游离的磷酸基团，经Bam HⅠ切割后成为链状DNA分子，含有2个游离的磷酸基团。限制酶BamHⅠ的识别序列和切点是-G↓GATCC-，因此质粒被限制酶BamHⅠ切割后所形成的黏性末端是-CTAG或GATC-。

（3）④过程需要采用动物细胞融合技术，常用的促融方法是灭活的病毒或PEG诱导。根据图中信息可知X为杂交瘤细胞。

（4）单克隆抗体的优点是特异性强、灵敏度高，并可大量制备。

（5）对该传染病疑似患者确诊时，可以从疑似患者体内分离出病毒，与已知病毒进行核酸序列比较；或采用抗原-抗体杂交法，即用图中的抗PBI蛋白的单克隆抗体进行特异性结合检测。