Question

为研究传统中草药的抗菌效果，某研究组用黄 莲等5种中草药对大肠杆菌等5种细菌进行了体外抑 菌实验。将各种中草药经煎煮、过滤浓缩为lg/ml的 煎剂，取200μl加入平板中央的无底小管牛津杯中，待测药物在培养基中扩散使其周围的细菌生长受到抑制而形成抑菌圈。实验结果如下表

五种中药的药敏实验结果（直径mm）

	大肠杆菌	金黄色葡萄球菌	绿脓杆菌	链球菌	伤寒沙门菌
黄莲	14	40	14	15	22
黄苓	12	25	12	12	14
秦皮	15	13	15	12	30
大黄	8	21	10	17	16
黄柏	—	18	—	—	17

注：抑菌圈直径<10mm为耐药（一），10 —15mm为中度敏感（+ ） ，15mm以上为高度敏感（ + + ）

（1）检测培养基是否被污染，应采用的方法是__________。

（2）本实验所用的接种方法为__________。接种时需要在酒精灯火焰附近，原因是__________。

（3）伤寒是由伤寒沙门菌引起的，它可以导致胃肠炎和败血症，据表可知，能较为有效治疗该病的中药为_________  ，判断依据是____________________。

（4）若要设计实验探究黄莲对金黄色葡萄球菌的最低抑菌浓度，可将lg/ml的中药煎剂进行梯度稀释，并以__________为对照，各取200μl加入细菌中央的牛津杯中，培养一段时间，抑菌圈直径为__________对应的中药煎剂浓度为最低抑菌浓度。

Answer

将未接种的培养基在适宜的温度下放置适宜的时间，观察培养基上是否有菌落产生 稀释涂布平板法 火焰周围的部分属于无菌区，以防空气中杂菌的污染 秦皮 伤寒沙门菌在含秦皮的培养基中抑菌圈直径最大 无菌水 10mm左右

【解析】

分析题表可知，大肠杆菌对黄莲、黄苓、秦皮表现出中度敏感，对大黄表现为耐药；金黄色葡萄球菌对黄莲、黄苓、大黄、黄柏表现为高度敏感，对秦皮表现为中度敏感；绿脓杆菌对黄莲、黄苓、秦皮、大黄均表现中度敏感；链球菌对黄莲、黄苓、秦皮表现为中度敏感，对大黄表现为高度敏感；伤寒沙门菌对黄莲、秦皮、大黄、黄柏表现为高度敏感，对黄苓表现为中度敏感。

（1）检测培养基是否被污染，应采用的方法是将未接种的培养基在适宜的温度下放置适宜的时间，观察培养基上是否有菌落产生；

（2）根据题图可知，本实验采用的接种方法为稀释涂布平板法；接种时为了防止空气中的杂菌污染，需要利用酒精灯火焰制造无菌区进行接种；

（3）据表可知，能够有效治疗伤寒的重要为秦皮，因为伤寒沙门菌在含秦皮的培养基中产生的抑菌圈最大；

（4）若要设计实验探究黄莲对金黄色葡萄球菌的最低抑菌浓度，则应设置无菌水为对照组；由于抑菌圈直径小于10mm表示耐药，故最低抑菌浓度对应的抑菌圈直径应在10mm左右。