Question

下图是制备抗埃博拉病毒VP40蛋白的单克隆抗体的过程。请回答下列问题：

（1）过程①中选用EcoRⅠ和 XhoⅠ两种限制酶切割的优点是___________________、___________。

（2）过程②中首先需要___________________ 处理大肠杆菌，使其处于感受态，VP40基因进人大肠杆菌后维持稳定并表达的过程称为___________________。

（3）与植物原生质体融合相比，过程④特有的方法是用_____________处理。通常在选择培养基中需加入抗生素，目的是____________________________。制 备单克隆抗体时，先用特定的选择性培养基进行筛选，获得____________________________，该细胞的特点是_________________。选择培养基上存活的杂交瘤细胞产生的抗体___________(填是或不)单克隆抗体。然后对上述细 胞进行抗体检测，选取____________________________的细胞克隆化培养。

（4）单克隆抗体最主要的优点在于它的________________、________________、________________。

（5）图示过程应用的生物技术有________________、________________、________________。

Answer

防止目的基因自身环化 防止目的基因与载体反向连接 Ca2+ 转化 灭活的病毒 防止培养过程中的杂菌污染 杂交瘤细胞 既能分泌专一的抗体、又能无限增殖 不是 能产生特定抗体(或能产生所需抗体、能产生抗埃博拉病毒VP40抗体) 特异性强 灵敏度高 大量制备 基因工程 动物细胞培养 动物细胞融合

【解析】

制备抗埃博拉病毒VP40蛋白的单克隆抗体的过程，①是目的基因与运载体结合；②是将目的基因导入受体细胞；③是VP40蛋白基因的表达或是VP40蛋白的合成；④过程是动物细胞融合过程。据此答题即可。

（1）过程①中选用EcoRI和XhoI两种限制酶切割可以使目的基因和质粒的两端获得不同的黏性末端，所以这样处理的优点是防止目的基因、质粒自身环化，防止目的基因与运载体反向连接。

（2）过程②中首先需要Ca2+处理大肠杆菌，使其处于感受态，VP40基因进入大肠杆菌后维持稳定并表达的过程称为转化。

（3）与植物原生质体融合相比原理基本相同，植物原生质体融合常用物理方法和化学方法，动物细胞融合常用的诱导因素有聚乙二醇和灭活病毒及电激，所以过程④特有的方法是用灭活的病毒处理。通常在选择培养基中需加入抗生素，目的是防止培养过程中的污染。用特定的选择性培养基进行筛选，只有杂交瘤细胞能存活下来，故获得的是杂交瘤细胞。杂交瘤细胞的特点是既能分泌专一的抗体、又能无限增殖。选择培养基上存活的杂交瘤细胞，还需要进行克隆化培养和抗体检测，经过多次筛选才可以获得。所以选择培养基上存活的杂交瘤细胞产生的抗体不是单克隆抗体。选取能产生特定抗体(或能产生所需抗体、能产生抗埃博拉病毒VP40抗体) 的细胞克隆化培养。

（4）单克隆抗体最主要的优点在于它的特异性强、灵敏度高、可大量制备。

（5）图示过程应用的生物技术有：基因工程、动物细胞培养、动物细胞融合。