Question

哥廷根小型猪已经成为国际上理想的异种器官移植的研究材料。如图表示科学家培育转基因小型猪的过程，其中调节基因可以抑制抗原决定基因的表达。请据图分析回答：

限制酶	识别序列和切割位点
BamH I
BuR I
Sma I
Pst I

 

（1）若通过①过程获得的调节基因M端的黏性末端是－CTAG，N端的黏性末端是－TTAA，则①②过程选用的限制酶是__________。构建重组质粒的目的是_______________________。

（2）核移植受体细胞常选择卵母细胞的原因是__________。

（3）③过程常用的方法是__________，⑤过程用到的技术手段是__________。在进行步骤⑤前，应对受体长白母猪进行__________处理。

（4）将转基因克隆小型猪器官向人类移植前，还需检测该克隆猪的__________，从而避免移植后发生免疫排斥反应。若转基因克隆小型猪符合移植要求，但其子代并不一定符合移植要求的原因是____________________________________________________________________。

Answer

BamHⅠ和EcoRⅠ 使目的基因在受体细胞中稳定存在，并可以遗传给下一代，同时使目的基因表达和发挥作用 卵母细胞体积大、易操作，含营养物质多，全能性高等 显微注射法 胚胎移植 同期发情 抗原决定基因是否被抑制（或调节基因是否发挥了抑制作用） 据分离定律分析克隆猪子代可能不含调节基因

【解析】

解答本题需熟记并理解基因工程的基本操作程序、核移植技术和胚胎移植的流程、胚胎移植的生理基础并形成清晰的知识网络。在此基础上，依据图示中限制酶的识别序列及切割位点等信息并结合问题情境进行相关问题的解答。

（1）分析题图可知，若通过①过程获得的调节基因M端的黏性末端是—CTAG，N端的黏性末端是—TTAA，则①②过程选用的限制酶是BamHI和EcoRI。构建重组质粒的目的是使目的基因能够在受体细胞中稳定存在，并可以遗传给下一代，同时使目的基因表达和发挥作用。

（2）卵母细胞体积大，易操作，含营养物质多，所以核移植的受体细胞常选择卵母细胞。

（3）将目的基因导入动物细胞常用显微注射法，所以③过程常用的方法是显微注射法，⑤过程表示将早期胚胎移植到代孕母体内，用到的技术手段是胚胎移植。在进行步骤⑤前，应对受体长白母猪进行同期发情处理，以提高胚胎移植的成功率。

（4）将转基因克隆小型猪器官向人类移植前，还需检测该克隆猪的抗原决定基因是否被抑制，从而避免移植后发生免疫排斥反应。若转基因克隆小型猪符合移植要求，但其子代并不一定符合移植要求，因为据分离定律分析，在产生生殖细胞时等位基因分离分别进入不同的子细胞，所以转基因克隆小型猪产生的生殖细胞中可能不含调节基因，导致其子代可能不含调节基因。