Question

农杆菌Ti质粒上的T-DNA可以转移并随机插入到被侵染植物的染色体DNA中。研究者将下图中被侵染植物的DNA片段连接成环，并以此环为模板进行PCR，扩增岀T-DNA插入位置两侧的未知序列，以此可确定T-DNA插入的具体位置。下列说法不正确的是（    ）

注：子链从引物的3^/端开始延伸

A.PCR扩增依据的是DNA分子双链复制的原理

B.进行PCR扩增需要的酶有解旋酶和热稳定DNA聚合酶

C.利用图中的引物②、③组合可扩增岀两侧的未知序列

D.通过与受体细胞的基因组序列比对，可确定T-DNA的插入位置

Answer

BC

【解析】

PCR技术：

1、概念：PCR全称为聚合酶链式反应，是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术。

2、原理：DNA复制。

3、前提条件：要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一对引物。

4、条件：模板DNA、四种脱氧核苷酸、一对引物、热稳定DNA聚合酶（Taq酶）。

5、过程：①高温变性：DNA解旋过程（PCR扩增中双链DNA解开不需要解旋酶，高温条件下氢键可自动解开）；低温复性：引物结合到互补链DNA上；③中温延伸：合成子链。

A、PCR扩增依据的是DNA分子双链复制的原理，A正确；

B、进行PCR扩增需要热稳定DNA聚合酶（TaqDNA聚合酶），但不需要解旋酶， B错误；

C、DNA的两条链反向平行，子链从引物的3/端开始延伸，则利用图中的引物①、④组合可扩增岀两侧的未知序列，C错误；

D、通过与受体细胞的基因组序列比对，即可确定T-DNA的插入位置，D正确。

故选BC。