Question

尿素是一种重要的农业氮肥，只有当土壤中的细菌将尿素分解成氨之后，才能被植物利用回答下列问题：

（1）某同学要分离土壤中能分解尿素的细菌，并统计每克土壤样品中的活菌数目，培养基配方如下表将各种物质溶解后，用蒸镏水定容到1000ml，再经高温灭菌，制成固体培养基备用。

KH2PO4	Na2HPO4	MgSO4-7H2O	蛋白胨	葡萄糖	尿素	琼脂
1．4g	2．1g	0．2g	1．0g	10．0g	1．0g	15．0g

①配制上述培养基的过程中，其基本步骤是________，其中溶化过程在烧杯中加入琼脂后，应不断地________，目的是________

②根据培养基的成分判断，该同学________(填能或不能)分离出土壤中分解尿素的细菌，原因是__________________。

（2）在分离尿素分解菌的实验中，大部分同学从培养基上筛选出大约50个菌落，而有一个同学从培养基上筛选出大约150个菌落，这种实验结果差异产生的原因可能是________(写出两点即可)。

（3）在筛选尿素分解菌的培养基中加入________指示剂可用来鉴定尿素，原理是尿素分解菌能将尿素分解成氨而使周围环境的pH改变从而使该指示剂变色。

Answer

计算、称量、溶化、灭菌、倒平板（用玻棒） 搅拌 防止琼脂糊底而导致烧杯破裂 不能 培养基中含蛋白胨，尿素不是唯一氮源，不能选择出只以尿素为氮源的微生物（或培养基中含蛋白胨，蛋白胨中含有氮元素） 所取的土样不同、培养基受到污染、操作过程失误等 酚红

【解析】

分解尿素的细菌能合成脲酶，脲酶能催化尿素水解，而其他微生物不能分解尿素，因此分离尿素分解菌的培养基应该以尿素为唯一氮源；尿素分解菌能将尿素琼脂培养基中的尿素分解生成氨，氨溶于水变成氢氧化铵，导致培养基变成碱性，使酚红指示剂呈现红色。

（1）①配置微生物培养基的基本步骤包括计算、称量、溶化、灭菌、倒平板；琼脂是凝固剂，所以在溶化过程在烧杯中加入琼脂后应该不断的搅拌，以防止琼脂糊底而导致烧杯破裂。

②根据表格分析，该培养基中的氮源有蛋白胨、尿素，而分离分解尿素的细菌应该以尿素为唯一氮源，因此该同学不能分离出土壤中分解尿素的细菌。

（2）根据题意分析，在分离尿素分解菌的实验中，大多数同学从培养基上筛选出大约50个菌落，而有一个同学却筛选出大约150个菌落，其可能的原因有：所取的土样不同、培养基受到污染、操作过程失误等。

（3）根据以上分析已知，在筛选尿素分解菌的培养基中加入酚红指示剂可用来鉴定尿素。