Question

传统食品发酵、环境污染治理等过程中都会有多种微生物的参与，在进行微生物培养过程中，为培养的微生物提供合适的营养和环境条件以及确保无处不在的其他微生物无法混入是操作过程中两个需要重点注意的问题。

（1）酸奶制作时常用的菌种是___________，培养该菌种时在培养基中除了加入所需的4种基本营养成分外还需要添加___________。

（2）进行倒平板操作时，倒平板的温度一般在50℃左右适宜，温度过高会烫手，温度过低__________。平板划线法不适合进行计数，只适用于微生物的提纯，并且在已划线的平板中__________区域的菌种最纯。

（3）不同的微生物培养的温度和时间往往不同，在培养箱中培养时细菌培养温度__________（填“高于”“低于”或“等于”）霉菌培养温度，培养时间_________（填“长于”或“短于”）霉菌培养时间。

（4）尿素分解菌经X射线照射后不能正常生长，添加某种维生素后才能正常生长，原因最可能是_________________________________________。

（5）若长期使用杀虫剂S（一种有机磷农药）可造成其在土壤中严重残留，而木霉能有效将其降解，若欲从该土壤中分离出木霉，该实验过程中“选择培养”这一步___________（填“可以”或“不可以”）省略。

（6）为了保持菌种的纯净，需要对菌种进行保藏，长期保存菌种可以采用__________的方法，放在__________℃冷冻箱中保存。

Answer

乳酸杆菌 维生素 培养基会凝固 最后一次划线的末端 高于 短于 在X射线的照射下导致部分尿素分解菌发生基因突变，从而缺少了合成某种维生素必需的酶 可以 甘油管藏 -20℃

【解析】

1、培养基是人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质；分为固体培养基和液体培养基，培养基中一般含有水、碳源、氮源和无机盐，其中碳源和氮源常采用蛋白胨和牛肉膏，因为它们来源于动物原料，含有糖、维生素和有机氮等营养物质。在提供上述几种主要营养物质的基础上，培养基还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物种和氧气的要求。
2、微生物常见的接种的方法（1）平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。（2）稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。

（1）酸奶制作时常用的菌种是乳酸菌，这是因为乳酸菌在制作酸奶时所起的作用是把葡萄糖转化为乳酸。培养该菌种时在培养基中除了加入所需的4种基本营养成分外还需要添加维生素，维生素是乳酸菌生长繁殖所必须的，在体内又不能合成，因此要在培养乳酸菌的培养基中添加维生素。

（2）进行倒平板操作时，倒平板的温度一般在50℃左右适宜，温度过高会烫手，温度过低培养基会凝固。平板划线法不适合进行计数，只适用于微生物的提纯，并且在已划线的平板中最后一次划线的末端区域的菌种最纯，这是因为在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌种数逐渐减少，最后可能形成单个菌落，达到稀释目的。

（3）不同的微生物培养的温度和时间往往不同，在培养箱中培养时细菌培养温度为37℃左右，霉菌培养温度在28℃左右，在培养箱中培养时细菌培养温度高于霉菌培养温度，故培养时间短于霉菌培养时间，这是因为霉菌属于真菌，其生长出菌丝体和孢子的时间较长。

（4）尿素分解菌经X射线照射后不能正常生长，添加某种维生素后才能正常生长，原因最可能是在X射线的照射下导致部分尿素分解菌发生基因突变，从而缺少了合成某种维生素必需的酶。

（5）若长期使用杀虫剂S（一种有机磷农药）可造成其在土壤中严重残留，而木霉能有效将其降解，若欲从该土壤中分离出木霉，该实验过程中“选择培养”这一步 可以省略，这是因为土壤中农药残留已经很严重了，这导致土壤中其它微生物的生长受到了抑制，而由于木霉能够将其分解，木霉在土壤中的数量会比较高，这样在筛选时可以省略掉选择培养。

（6）为了保持菌种的纯净，需要对菌种进行保藏，长期保存菌种可以采用甘油管藏的方法，放在-20℃冷冻箱中保存。