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限制性核酸内切酶EcoRⅠ对DNA的识别序列是5′GAATTC3′,当用它处理环...

限制性核酸内切酶EcoRⅠ对DNA的识别序列是5′GAATTC3′,当用它处理环状DNA分子时,可形成(    )。

A.两端相同的线性DNA,有黏性末端

B.两端相同的线性DNA,无黏性末端

C.两端不同的线性DNA,一端有黏性末端,一端无黏性末端

D.两种末端无法判断

 

A 【解析】不同限制性核酸内切酶切割位点是不相同的,DNA分子经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式,即黏性末端和平末端。如果是限制酶EcoRⅠ,则在它识别序列的中心轴线两侧进行切割,产生黏性末端;如果是限制酶SmaⅠ,则在它识别序列的中心轴线处切割,产生的是平末端。  
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考点分析:
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科学家从某细菌中提取抗盐基因,转入烟草并培育成转基因抗盐烟草。如图是转基因抗盐烟草的培育过程,含目的基因的DNA和质粒上的箭头表示相关限制酶的酶切位点。请分析回答下面的问题。

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(1)①过程获得的抗盐基因可用PCR技术进行扩增,该技术须用________酶,所需的原料是________。

(2)已知几种限制酶识别序列及其切割位点(如下表):

限制酶

BamHⅠ

Hind 

EcoR 

Sma 

识别序列及

切割位点

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用图中的质粒和目的基因构建重组质粒,不能使用Sma  Ⅰ酶切割,原因是

__________________________________________________________________

_________________________________________________________________。

图中①②过程为防止质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化,应选用________酶对外源DNA、质粒进行切割。

(3)图中⑤、⑥依次表示组织培养过程中抗盐烟草细胞的________、________过程。

(4)为确定转基因抗盐烟草是否培育成功,既要用放射性同位素标记的________作探针进行分子杂交检测,又要在个体水平上鉴定,后者具体过程是___________________________________________________。

 

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在培育转基因植物的研究中,卡那霉素抗性基因(kanr)常作为标记基因,只有含卡那霉素抗性基因的细胞才能在卡那霉素培养基上生长。下图为获得抗虫棉的技术流程。

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请据图回答下面的问题。

(1)A过程需要的酶有___________________________________________。

(2)B过程及其结果体现了质粒作为载体必须具备的两个条件是

________________________________________________________________。

(3)C过程的培养基除含有必要营养物质、琼脂和激素外,还必须加入________。

(4)在D过程中,抗虫基因遗传信息的传递过程是_____________________。

(5)获取真核生物的基因常用的方法是______________,包括_____________。

(6)如果利用DNA分子杂交原理对再生植物进行检测,D过程应该用

_______________________________________________________作为探针。

(7)科学家在进行实验过程中,采用了两种方案:一是将抗虫基因导入离体的棉花叶片细胞进行植物组织培养;请你想另外一种方案:可以将抗虫基因导入植物的________中,再进行培养,导入成功的标志是

_______________________________________________________________。

 

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检测转基因生物染色体DNA上是否插入了目的基因的常用方法是(    )。

A.DNA分子杂交技术                                  B.荧光分子标记技术

C.放射性同位素标记技术                              D.显微注射技术

 

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2012年7月21日北京遭遇了61年不遇的特大降水,遇难人员的甄别很多需要提取样本DNA跟公安部门核实,才能确认遇难者身份。遇难遗体进行DNA鉴定时常用到PCR技术,而且样本DNA必须被完全酶切,否则将会影响鉴定结果。下列有关叙述错误的(    )。

A.切割样本DNA的工具是限制性核酸内切酶

B.PCR技术可判断亲缘关系,但不能用于基因诊断

C.利用PCR技术扩增样本DNA所用的酶是Taq酶

D.鉴定时的DNA探针是用放射性同位素作标记的DNA片段

 

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将目的基因导入玉米茎尖分生区细胞和小鼠受精卵,应分别采用的方法是(    )。

A.显微注射法  农杆菌转化法

B.基因枪法  花粉管通道法

C.农杆菌转化法  显微注射法

D.基因枪法  显微注射法

 

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