Question

氯苯化合物是重要的有机化工原料，因其不易降解，会污染环境。某研究小组依照下列实验方案筛选出能高效降解氯苯的微生物SP1菌。培养基配方如表1。

表1　培养基的组成

液体培养基	蛋白胨/g	牛肉 膏/g	氯苯/mg	氯化 钠/g	硝酸铵/g	无机盐 (无碳)	蒸馏 水/L
Ⅰ号	10	5	5	5	－	－	1
Ⅱ号	－	－	50	5	3	适量	1
Ⅲ号	－	－	20～80	5	3	适量	1

请分析回答下列问题：

(1)配制Ⅱ号固体培养基时，除添加Ⅱ号液体培养基成分外，还应添加1%的_______。配制培养基熔化该物质时往往需要用玻璃棒搅拌，原因是                                          。

(2)培养基配制时，操作的先后顺序是计算→ ____                                       。

(3)从用途上来说，Ⅱ号培养基属于____      ___培养基。在Ⅱ号培养基中，为SP1菌提供氮源的成分是________                                。

(4)在营养缺乏或环境恶劣时，SP1的菌体变成一个圆形的休眠体，这种休眠体被称为________。若想杀死这种休眠体，在实验室中我们通常选择                      （消毒/灭菌）。

(5)将SP1菌接种在含不同浓度氯苯的Ⅲ号培养液中培养，得到生长曲线如图。

由图可知，SP1菌在_______       _培养条件下最早停止生长，其原因是_______             。

Answer

（每空1分，共9分）

(1)琼脂 防止琼脂糊底而导致烧杯破裂 (2)称量→溶化→灭菌→倒平板 (3) 选择 硝酸铵 (4)芽孢 灭菌 (5)20 mg/L氯苯 碳源最早耗尽

【解析】

试题分析：（1）固体培养基中除添加营养成分外，还需要加入一定量的凝固剂，如琼脂；配制培养基熔化该物质时往往需要用玻璃棒搅拌，原因是防止琼脂糊底而导致烧杯破裂。

（2）细菌培养的基本过程：配制培养基（称量→溶化→调pH→分装→加棉塞→包扎）→灭菌→搁置斜面→接种→培养。

（3）根据培养基的用途可分为基本培养基、选择培养基和鉴别培养基等，题中Ⅰ号培养基属于基本培养基，由于Ⅱ号培养基中的碳源仅是氯苯，因此，培养基属于选择培养基。Ⅱ号培养基成分中含氮物质为硝酸铵，可以为SP1菌株提供氮源。

(4)当环境条件较差时，一些菌体会形成芽孢休眠体，以适应不良环境。若想杀死这种休眠体，在实验室中我们通常选择灭菌的方式。

（5）SP1菌株以氯苯为碳源，当氯苯被耗尽时，菌株因缺少碳源而不能继续生存，故氯苯含量越少，SP1菌株越早停止生长。根据曲线图可知，氯苯浓度为20 mg/L时，菌体数量最先减少，最可能是由于氯苯被耗尽。

考点：本题主要考查培养基的相关知识，意在考查考生能运用所学知识与观点，通过比较、分析与综合等方法对某些生物学问题进行解释、推理，做出合理的判断。