Question

日本下村修、美国沙尔菲和美籍华人钱永健因在研究绿色荧光蛋白(GFP)等方面的突出贡献，获得2008年度诺贝尔化学奖。下图为我国首例绿色荧光蛋白(GFP)转基因克隆猪的培育过程示意图，据图回答：

(1)绿色荧光蛋白基因在该实验中是作为________基因。图中通过过程①、②形成重组质粒，需要限制酶切取目的基因和质粒。限制酶Ⅰ的识别序列和切点是—G^↓GATCC—，请画出质粒被限制酶Ⅰ切割后形成的黏性末端：______________。

(2)过程③将重组质粒导入猪胎儿成纤维细胞时，采用最多也最有效的方法是_________________________。

(3)如果将切取的GFP基因与抑制小猪抗原表达的基因一起构建到载体上，GFP基因可以作为基因表达载体上的标记基因，其作用是______________________________________________________。

(4)目前科学家们通过蛋白质工程制造出了蓝色荧光蛋白、黄色荧光蛋白等，采用蛋白质工程技术制造出蓝色荧光蛋白过程的正确顺序是(用数字表示)________________。

①推测蓝色荧光蛋白的氨基酸序列和基因的核苷酸

②蓝色荧光蛋白的功能分析和结构设计序列

③蓝色荧光蛋白基因的修饰(合成)

④表达出蓝色荧光蛋白

Answer

）

目的

(2)显微注射技术

(3)为了鉴定受体细胞中是否含有目的基因

(4)②①③④

【解析】

试题分析：(1)绿色荧光蛋白基因可以控制绿色荧光蛋白的合成，可作为该实验中的基因。已知限制酶Ⅰ的识别序列和切点是—G↓GATCC—，根据其识别与切割的特异性，切割后形成的黏性末端是：

(2)将重组质粒导入动物细胞最常用的方法是显微注射技术。

(3)基因工程中标记基因的作用是鉴定受体细胞中是否含有目的基因或者是目的基因是否已经导入了受体细胞。

(4)通过蛋白质工程制造出了蓝色荧光蛋白、黄色荧光蛋白过程是: 蓝色荧光蛋白的功能分析和结构设计序列、推测蓝色荧光蛋白的氨基酸序列和基因的核苷酸、蓝色荧光蛋白基因的修饰(合成)、表达出蓝色荧光蛋白。

考点：本题考查基因工程的相关知识，意在考查考生理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力。