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土壤是“微生物的天然培养基”,下面是有关土壤中分解尿素的细菌分离和计数的实验过程...

土壤是“微生物的天然培养基”,下面是有关土壤中分解尿素的细菌分离和计数的实验过程,请根据图回答相关问题:

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(1)能分解尿素的细菌代谢类型为 异氧需氧型 ,应从富含有机质的土壤表层取土样.

(2)为分离出土壤中分解尿素的细菌,应该用 尿素为唯一氮源 的培养基进行分离,并加入 酚红 指示剂进行鉴别.

(3)若取土样5g,应加入 45 ml的无菌水配制成稀释10倍土壤溶液.因土壤中细菌密度很大,需要不断加以稀释,配制成如图所示的不同浓度的土壤溶液.取样稀释前,一定要 摇均 以减少误差.将103﹣107倍的稀释液分别吸取0.1mL加入到固体培养基上,用 涂布器(玻璃刮刀) 将菌液铺平.这种接种方法称为 稀释涂布(平板)法

(4)将接种的培养皿放置在37恒温培养箱中培养24h~48h,观察并统计具有 红色环带 (现象)的菌落数,结果如下表,其中 105或106 倍的稀释比较合适.

稀释倍数    103    104    105    106    107

菌落数(个)    500    367    248    36    18

 

(1)异氧需氧型 (2)尿素为唯一氮源 酚红 (3)45 (4)摇均(震荡、混匀) 涂布器(玻璃刮刀) 稀释涂布(平板)法 (5)红色环带 105或106 【解析】 试题分析:阅读题干和题图可知,本题是考查土壤中分解尿素的细菌的分离与计数的知识,根据问题涉及的具体内容梳理相关知识点,然后分析解答. 【解析】 (1)能分解尿素的细菌将尿素氧化成氨气,代谢类型为异氧需氧型. (2)尿素为唯一碳源的培养基上,只有能分解尿素的菌才能以尿素作为氮源生长繁殖,不能分解尿素的菌因缺乏氮源无法生长繁殖,因此分离出土壤中分解尿素的细菌,应该用尿素为唯一碳源的培养基进行分离,分解尿素的菌在分解尿素时产生氨气,使酚红指示剂显红色,所以要加入酚红指示剂进行鉴别. (3)若取土样5g,应加入45ml的无菌水配制成稀释10倍土壤溶液,样品的稀释程度直接影响平板上生长的菌落的数目,选用一定稀释范围的样品进行培养,取样稀释前,一定要将菌液摇匀以减少误差;将103﹣107倍的稀释液分别吸取0.1mL加入到固体培养基上,用稀释涂布平板法将菌液用涂布器涂布到固体培养基上. (4)将接种的培养皿放置在37℃恒温培养箱中培养24h~48h,观察并统计具有红色环带的菌落既是分解尿素的菌的菌落,估算样品中的活菌数时,往往选取菌落数在30 到300之间的平板,分析表格是数据可知,105和106的稀释度平板菌落数在这一范围.
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考点分析:
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尿素是一种高浓度氮肥且长期施用没有不良影响,但尿素只有通过土壤中某些细菌的分解作用,才能被植物吸收利用.某同学要分离出土壤中能分解尿素的细菌,并尝试进行计数,培养基配方如下:

K2HPO4    NaCl    H2O    葡萄糖    尿素    酚红    琼脂

0.12g    0.12g    15mL    0.025g    2.0g    0.25mg    0.5g

(1)分解尿素的细菌都能合成 脲酶 ,该种细菌在生态平衡中起到什么作用? 参与了氮循环(或维持氮平衡) .写出细菌分解尿素的方程式 满分5 manfen5.com

(2)根据培养基的成分判断,该同学能否分离出土壤中分解尿素的细菌? 不能 (能/不能),原因是 琼脂是未被纯化的混合物,内含一定的含氮化合物,尿素不是唯一氮源,不能选择出只以尿素为氮源的微生物

(3)分离得到分解尿素的细菌后,如果要扩大培养,则应选择 培养基进行培养.培养一段时间后,使用 对微生物细胞进行计数.计数过程中,下列哪种行为会影响计数的准确性 A

A.计数时直接从静置培养的试管底部取培养液进行计数

B.如果方格内微生物细胞数量多于300 个,培养液先稀释后再计数

C.如果微生物细胞有粘连,要数出团块中的每一个细胞

D.压在方格线上的细胞只计左线和上线上的细胞数

(4)为了提高尿素肥效,可以将分解尿素的酶和尿素混合,制成“加酶尿素”.为了提高“加酶尿素”中酶的利用率,可采用 固定化酶 技术.

 

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有关生物技术的操作过程或应用的叙述,错误的是(  )

A.测定泡菜中亚硝酸盐含量时需要标准显色液

B.可用聚乙二醇促进植物细胞原生质体的融合

C.胚胎分割技术可看做是动物无性繁殖的方法

D.以尿素作为唯一碳源的培养基用于鉴别细菌

 

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在做分离分解尿素的细菌实验时,A同学从对应106培养基上筛选出大约150个菌落,而其他同学只选择出大约50个菌落.下列有关叙述,出现科学性错误的是(  )

A.甲同学出现这种结果的原因可能是由于土样不同,也可能是操作过程出了问题

B.可以将甲同学配制的培养基在不加土样的情况下进行培养作为空白对照,以证明培养基是否受到污染

C.将其他同学用与甲同学一样的土壤进行实验,如果结果与甲同学一致,则可以证明甲同学无误

D.B、C选项的实验思路都遵循了实验的对照原则

 

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分离土壤中分解尿素的细菌,对培养基的要求是(  )

加尿素    

不加尿素        

加琼脂糖      

不加琼脂糖

加葡萄糖  

不加葡萄糖      

加硝酸盐      

不加硝酸盐.

A.①③⑤⑦    B.②④⑥⑧    C.①③⑤⑧    D.①④⑥⑦

 

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以下叙述不正确的是(  )

A.可用放射性同位素标记的DNA分子作探针来检测遗传病

B.通过比色法来检测亚硝酸盐含量需要配制标准显色液

C.利用DNA和蛋白质在不同浓度NaCl中溶解度不同粗提DNA

D.在以尿素为唯一氮源培养基中生长的细菌均为只能利用尿素的细菌

 

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