如图为分离并统计分解纤维素的微生物的实验流程,据此回答有关问题:
(1)要从富含纤维素的环境中分离纤维素分解菌,从高温热泉中寻找耐热菌,这说明 根据目的菌株对生存环境的要求,到相应的环境中去寻找 .
(2)接种微生物最常用的是平板划线法和稀释涂布平板法,本实验宜采用 释稀涂布平板 法.
(3)用稀释涂布平板法统计菌落数目时,最好选择菌落数在 30~300 间的平板进行计数.若统计出在一稀释倍数为105的平板上的平均菌落数为30个,所用稀释液的体积为0.2mL,则每克样品中的菌落数为 1.5×107个 .
(4)在分离尿素分解菌所用的培养基中可加入 酚红 指示剂,根据指示剂的颜色可鉴定某种细菌能否分解尿素,若有分解尿素的细菌,培养基将会呈现 红色 .
(2012•保定一模)秸秆的主要成分是纤维素,利用秸秆粉碎液可以生产燃料乙醇.回答下列相关问题.
(1)利用玉米秸秆生产乙醇首先选用 纤维素 酶进行水解,使之转化为发酵所需的葡萄糖等,然后进行发酵获得乙醇,反应式是 C6H12O62C2H5OH+2CO2+能量 .
(2)具有耐酸特性的酵母菌是理想的酒精发酵菌种,原因是 酵母菌发酵产生二氧化碳,使发酵液PH降低 .为获取耐酸特性的酵母菌,可将野生酵母菌进行诱变,然后利用 选择 培养基筛选出突变菌.
(3)利用获得的突变菌和糖汁进行酒精发酵实验,为防止外来杂菌入侵,需要对培养基 灭菌 ,对操作空间 消毒 .
(4)为了探究最佳秸秆粉碎液浓度,设置梯度实验进行探究.在实验中可利用 活菌计数 法或 显微镜直接计数 法测定酵母菌数量.
乙醇可部分替代石油燃料,利用纤维素酶、酵母菌等可将纤维素转化成乙醇,耐高温纤维素酶可以加速催化纤维素的水解,从而有利于酵母菌发酵产生乙醇.
(1)某研究小组将产纤维素酶的菌株,通过诱变和高温筛选获得新菌株.为探究新菌株所产纤维素酶能否耐受80℃高温,进行了以下实验
试管1 试管2
第一步 加入适量缓冲液 加入等量纤维素酶溶液(缓冲液配制)
第二步 80℃水浴保温 30min
第三步 加入 适量纤维素液
第四步 60℃水浴保温10min
第五步 加入 斐林试剂或班氏糖定性试剂
第六步 沸水浴中加热2min,观察实验现象
结果与结论:①若 试管1内呈蓝色,试管2内有砖红色沉淀产生 ,则表明该纤维素酶能耐受80℃高温;
②若 试管1和2内均呈蓝色 ,则表明该纤维素酶不能耐受80℃高温.
(2)酵母菌发酵产生的乙醇属于 次级 (填“初级”或“次级”)代谢产物.
纤维素酶在洗涤剂、棉织品水洗抛光整理和制浆造纸等行业上有巨大的应用价值.科研人员作了如下实验,请分析回答:
(1)图1的①中接种的是造纸厂附近土壤,②培养基中的碳源应为 纤维素为唯一碳源 ⑤~⑨中分别培养的是通过 刚果红 染色鉴定法选取透明圈较大的5个菌株.
(2)将这5个菌株进行发酵产生的酶,加入到纤维素溶液中,测定 还原糖含量 ,由图2可知3号菌株酶活力最高.
(3)对破壁前后的酶活力进行了比较,测得未破壁的酶活力为3540U/ml,已破壁的酶活力为94U/ml.由此可知,该菌所产纤维素酶为 胞外酶 酶.
(4)要测定该酪的热稳定性,应采取的实验方案是 取5只装有等量菌液的试管,置于5种不同的温度条件,培养相同时间,测定还原糖的含量,若测得还原糖含量变化不大,则说明该菌的热稳定性较好. .
饲养动物常用的植物饲料中含有难溶的植酸钙等物质,很难被动物吸收利用,还影响对其他营养物质的利用.若在饲料中添加植酸酶,则能催化其水解成为可以吸收利用的磷酸盐等.以下是科研人员从作物根部土壤中分离产植酸酶的菌株的过程示意图.请分析作答.
(1)培养基中除了添加植酸钙以外,应含有 碳源 、 氮源 、水、无机盐等基本营养物质.
(2)为防止杂菌污染,要对培养基和培养皿等进行 灭菌 ,而且须将接种后的培养皿呈 倒置 状态放置.
(3)接种以前进行的一系列操作,目的是在培养皿表面形成 单个菌落 .根据土壤样品的稀释倍数和接种稀释液的体积,统计平板上的 菌落数 就能大致推测出样品中的活菌数.
(4)由于植酸钙的不溶解性,使培养基中形成白色浑浊.产植酸酶的菌株会水解植酸钙,菌落的周围将形成透明的区域,根据透明区域的有无,可初步判断该菌是否产植酸酶.实验结果显示A~E五种菌株中, E 是产植酸酶的理想菌株.
(5)获得目的菌以后,若要用于植酸酶的生产,还需要进行 扩大培养 .
(2012•临沂二模)【生物一生物技术实践】
废纸的主要成分是木质纤维,科技人员将其转化为一种新的资源﹣﹣乙醇.下图是工业上利用微生物由纤维素生产乙醇的基本工艺流程.请回答相关问题:
(1)①环节要选择的微生物是 纤维素分解酶 ,可将从富含纤维素土壤中获得的微生物培养在以纤维素为碳源,并加入 刚果红 的培养基上筛选周围有 透明圈 的菌落.
(2)将上述筛选出的菌进行培养,则②中获得的酶是 纤维素 酶.该酶至少包括C1酶、Cx酶和 葡萄糖苷酶 三种组分.
(3)③环节中被接入的常见菌种是 酵母菌 ,为了确保获得产物乙醇,④过程要注意避免污染杂菌并要注意 发酵装置密闭(保证无氧环境) .
(4)生产中为了降低酶的成本首先要通过基因工程等技术手段对产酶微生物进行改造,提高酶的产量,还可利用 固定化酶 等技术使酶能够重复利用.