Question

（16分）回答下列以CuSO₄为实验试剂的有关题目。

Ⅰ．重金属离子会导致蛋白质分子变性，某小组进行实验探究铜离子对唾液淀粉酶活性的影响，步骤如下。请回答：

（一）实验步骤

①取两支洁净的试管，编号A、B，A管加入1% CuSO₄溶液和pH6.8缓冲液各1mL，B 加

入                                     各1mL。

②往两支试管各加入等量相同浓度的唾液淀粉酶溶液1mL。

③往两支试管各加入等量相同浓度的淀粉溶液1mL。

④                                                            。

⑤取出试管，各加入碘液3滴，观察颜色变化。

（二）讨论与分析

（1）加入缓冲液的作用是                                            。

（2）有同学提出由于CuSO₄溶液呈蓝色，用上述步骤的检测方法可能会对实验结果产生干扰，请你提出另外的一种结果检测方法并预估实验结果。

①检测方法：                                                。

②预估结果：A管：                   ；B管：                   。

II．微核是细胞在有丝分裂过程中因各种有害因素损伤，使细胞核成分残留在核外而形成的微小染色质块。当外界环境中存在一定浓度的致突变物时，会使具有微核的细胞增多。某小组进行实验研究了不同浓度的CuS0₄溶液对绿豆根尖细胞微核及染色体行为的影响，实验结果如下图所示，请分析回答：

（1）观察绿豆根尖细胞微核及染色体行为，需制作临时装片，顺序是             。

（2）结果显示，当Cu质量浓度在0-80 mg/L范围内时，随着Cu质量浓度增加，微核率增大，当Cu质量浓度为100mg/L、120mg/L时，绿豆根尖细胞微核率分别只有1.619%、0.507%，请解释此现象：                     。

Answer

Ⅰ．（一）①蒸馏水和pH6.8缓冲液

④放入37℃恒温水浴（或适宜温度下）保温一段时间

（二）（1）维持反应液中pH的稳定

（2）①取出试管，各加入斐林试剂1mL，50-65℃水浴加热2分钟，观察颜色变化

②无砖红色（或蓝色） 出现砖红色沉淀

II．（1）解离→漂洗→染色→制片

（2）因为极高浓度的Cu离子溶液抑制了绿豆根尖分生组织细胞的分裂

【解析】

试题分析：I.（一）由题意可知是探究铜离子对唾液淀粉酶的影响，实验中应遵循单一变量原则和控制无关变量原则，作为对照组故在B试管内应加入等量蒸馏水和pH6.8缓冲液。唾液淀粉酶的最适温度在37℃，故应放在37℃恒温水浴（或适宜温度下）保温一段时间使酶发挥作用，然后滴加碘液观察颜色变化。如果A组是蓝色，说明铜离子对唾液淀粉酶有抑制作用，如果和对照组一样说明没有抑制作用。

（二）（1）加入缓冲液是维持反应液中pH的稳定。

（2）因变量还可以用生成物的多少来进行检测。唾液淀粉酶可以将淀粉分解为还原糖，还原糖可以用斐林试剂在水浴加热条件下呈砖红色来检验，故可以取出试管，各加入斐林试剂1mL，50-65℃水浴加热2分钟，观察颜色变化。最可能的结果是A不出现砖红色，B出现砖红色。

II、（1）因为微核是细胞在有丝分裂过程中，要观察的话需要进行制作装片，即进行解离、漂洗、染色、制片然后进行显微镜观察。

（2）由表可知当Cu质量浓度为0-80 mg/L范围内时，随着Cu质量浓度增加，微核率增大，当Cu质量浓度为100mg/L, 120mg/L时，绿豆根尖细胞微核率反而降低了，由题意可知微核是有丝分裂中出现的，当Cu浓度升高时，很有可能是因为极高浓度的CU2+溶液已抑制了绿豆根尖分生组织细胞的分裂，所以微核率降低。

考点：本题考查生物学实验相关知识，意在考察考生对知识点的理解程度和应用能力。