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(15分)自然界中能够产生生物荧光的酶的统称为荧光素酶。荧光素酶及其合成基因在生...

(15分)自然界中能够产生生物荧光的酶的统称为荧光素酶。荧光素酶及其合成基因在生物研究中有着广泛的利用。

(1)荧光素酶基因常被作为基因工程中的标记基因,其作用是将__________________筛选出来。

(2)下表为4种限制酶的识别序列和酶切位点,右下图为含有荧光素酶基因的DNA片段及其具有的限制酶切点。若需利用酶切法(只用一种酶)获得荧光素酶基因,最应选择的限制酶是____________。

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(3)利用PCR技术扩增荧光素酶基因是利用________________的原理,使荧光素酶基因数量呈______________方式增加。

(4)迄今为止,可将上述具有荧光素酶基因的运载体导入动物细胞的技术,应用最多的、最有效的是________________。经一系列步骤,将所获得的胚胎早期培养一段时间后,再移植到雌性动物的____________或子宫内,使其发育成为具有新性状的动物。

(5)囊胚阶段的胚胎进行胚胎分割,可以提高胚胎的利用率,但在进行分割时应注意____________________________

(6)荧光素酶在ATP的参与下,可使荧光素发出荧光。生物学研究中常利用“荧光素一荧光素酶发光法”来测定样品中ATP的含量。某研究小组对“测定ATP时所需荧光素酶溶液的最佳浓度”进行了探究。

[实验材料]1×10-8mol/L ATP标准液、缓冲溶液、70 mg/L荧光素溶液(过量)、浓度分别为10、20、30、40、50、60、70 mg/L的荧光素酶溶液。

[实验结果]见下图。

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[实验分析与结论]

①实验过程:为使结果更加科学准确,应增设一组___________________________作为对照。除题目已涉及的之外,还需要严格控制的无关变量有__________(至少写出一个)。

②实验结果:由图C可知,____________点所对应的荧光素酶浓度为最佳浓度。

(7)食品卫生检验中,可利用上述方法测定样品中细菌的ATP总含量,进而测算出细菌的数量,判断食品污染程度。测算的前提是每个细菌细胞中ATP的含量____________。

 

(1)含有目的基因的细胞 (2)MspI (3)DNA双链复制 指数 (4)显微注射技术 输卵管 (5)将内细胞团均等分割 (6)①浓度为0mg/L的荧光素酶溶液 温度(或“反应时间”等) ②d (7)大致相同(且相对稳定) 【解析】 试题分析: (1)标记基因的作用是将含有目的基因的细胞筛选出来。 (2)分析表格中各种限制酶的酶切位点可知,SmaⅠ识别的序列都可以被限制酶MspI切割,根据由图中目的基因两端的酶切位点可以推知,用限制酶SmaⅠ进行切割即可切下目的基因。 (3)PCR技术的原理是体外进行DNA复制;PCR技术可以使目的基因以指数形式增长。 (4)将目的基因导入受体细胞的方法是显微注射技术;早期胚胎培养一段时间后,移植到雌性动物的输卵管或子宫内,使之完成胚胎发育。 (5)对囊胚进行胚胎分割时,一定要注意把内细胞团细胞均等分割。 (6)①由于实验目的是测定ATP时所需荧光素酶溶液的最佳浓度,因此自变量为荧光素酶的浓度,为了使结果更加科学准确,应增设一组空白对照组,即浓度为0mg/L的荧光素酶溶液(或蒸馏水);温度、PH等为无关变量。 ②分析图C,d点时,发光强度达到最大,此时对应的荧光素酶的浓度为最佳浓度。 (7)根据细菌的ATP总含量来测算细菌的总数量,前提条件是细菌中的ATP的含量大致相同,只有这样才能用来估算。 考点:本题考查基因工程、胚胎工程和生物实验的有关知识,意在考查考生识记能力和理解所学知识的要点,把握知识间的内在联系的能力;具有对一些生物学问题进行初步探究的能力,包括运用观察、实验与调查、假说演绎、建立模型与系统分析等科学研究方法。  
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(15分)生物兴趣小组试图探究牛和山羊的瘤胃中的微生物对尿素是否有分解作用,设计了以下实验,并成功筛选到能降解尿素的细菌(目的菌)。培养基成分如左表所示,实验步骤如右图所示。请分析回答问题:

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(1)培养基中加入尿素的目的是___________,原理是_____________。从同化作用类型来看的,该菌属于____________________。

(2)实验需要振荡培养,原因是______________。转为固体培养时,常采用________的方法接种,获得单菌落后继续筛选。

(3)在实验过程中:①培养基、培养皿;②玻棒、试管、锥形瓶、吸管;③瘤胃中液体。其中需要灭菌是____________(填序号)。

(4)分离分解尿素的细菌实验时,甲同学从培养基上筛选出大约150个菌落,而其他同学只选择出大约50个菌落。甲同学实验结果差异的原因可能有__________(填序号)

①取样不同    ②培养基污染    ③操作失误    ④没有设置对照

(5)以尿素为唯一氮源的培养基培养“目的菌”后,加入_________指示剂后变红色,说明“目的菌”能分解尿素。理由是_____________________。

(6)为进一步确定取自瘤胃中液体的适当稀释倍数,将接种的培养皿放置在37℃恒温培养箱中培养24h~48h,观察并统计具有红色环带的菌落数,结果如下表,其中_____________倍的稀释比较合适。

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(10分)如图曲线表示各类遗传病在人体不同发育阶段的发病风险,请分析回答:

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(1)图中多基因遗传病的显著特点是_________________________。

(2)AS综合征是一种由于患儿脑细胞中UBE3A蛋白含量缺乏导致的神经系统发育性遗传病。父、母方第15号染色体上相关基因的作用机理分别如下图所示。请分析回答以下问题:

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①研究表明,人体非神经组织中的来自母方或父方的UBE3A基因都可以正常表达,只在神经组织中UBE3A基因表达才会被抑制,说明该基因的表达具有_______性。

②由于UBE3A基因和SNRPN基因___________,所以它们的遗传关系不遵循自由组合定律。

③对绝大多数AS综合征患儿和正常人的UBE3A基因进行测序,相应部分碱基序列如右图所示。

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由此判断绝大多数AS综合征的致病机理是:_____________,导致基因突变。

(3)人类第7和第9号染色体之间可发生相互易位(细胞内基因结构和种类未发生变化)如甲图所示,乙图为某痴呆患者的家族系谱图。已知Ⅰ-2、Ⅱ-2为甲图所示染色体易位的携带者,后代如果出现9号染色体“部分三体”(细胞中出现某—染色体某—片段有三份),则表现为痴呆,如果出现9号染色体“部分单体”(细胞中出现某一染色体某一片段的缺失),后代早期流产。

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现已知I-2、Ⅱ-2的后代中有因早期流产而导致胎儿不能成活的,Ⅲ-3已出生且为7/9染色体易位携带者(含有A、B易位染色体)的概率是____________。

 

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为防治果园内蝽虫等植食性害虫,减少农药的使用,有人尝试在苹果园的株间种植矮小的白三叶草。对比研究苹果一白三叶草复合果园和苹果单一果园中各类昆虫所占的百分比,结果如下图。请回答:

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(1)据图甲分析,复合果园中蝽虫等植食性害虫明显减少,生态稳定性得以提高。从种间关系的角度分析原因,这可能是随着________的比例增加,通过__________等种间关系来消灭害虫。

(2)若要了解蝽虫等植食性害虫的繁殖情况,需要进一步调查卵的种群密度,通常采用方法是________________。

(3)白三叶草耐阴性好,营养丰富,可作为饲料或绿化观赏,选它跟苹果搭配种植,利于提高果园对__________利用率,使能量尽可能多的流向对人类有益的部分。

(4)图乙示能量流经该果园第二营养级的示意图,请用恰当的箭头和文字将补充完整。

 

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(10分)北极熊是生活在寒冷地带的一种哺乳动物。下图为持续寒冷刺激下北极熊机体调节褐色脂肪组织细胞(BAT细胞)产热过程的示意图。请据图分析回答:

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(1)图中①~③体现了激素分泌的__________调节机制。

(2)BAT细胞内的UCP-1基因的表达与________的共同调节有关。

(3)有氧呼吸所需的ATP合成酶大量分布在线粒体内膜上,能在跨膜H浓度梯度的推动下合成ATP。进入线粒体的UCP-1蛋白,导致H外渗而消除胯膜的H梯度,线粒体虽能继续产生CO2和H2O,但有氧呼吸释放的能量却大部分转变成为热能。造成上述结果的原因可能是_______________。

(4)综上所述,在持续寒冷的环境中,北极熊通过上述________调节方式引起BAT细胞内的__________,从而实现了产热增加,维持了体温的稳定。

 

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(10分)萌发的小麦种子中的淀粉酶主要有α-淀粉酶(在pH3.6以下迅速失活,但耐热)、β-淀粉酶(不耐热,70℃条件下15min后就失活,但耐酸)。以下是以萌发的小麦种子为原料来测定α-淀粉酶催化效率的实验,请回答下列与实验相关的问题。

[实验目的]测定40℃条件下α-淀粉酶的催化效率。

[实验材料]萌发3天的小麦种子。

[主要器材]麦芽糖标准溶液、5%淀粉溶液、斐林试剂、蒸馏水、恒温水浴锅、试管等。

[实验步骤]

(1)制备不同浓度麦芽糖溶液,与斐林试剂生成标准颜色。取7支洁净试管编号,按下表中所示加入试剂,而后将试管置于60℃水浴中加热2min,取出后按编号排序。

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表中Z代表的数值是______________。

(2)以萌发的小麦种子制取淀粉酶溶液,将装有淀粉酶溶液的试管置于____________,取出后迅速冷却,得到α-淀粉酶溶液。

(3)取A、B、C、D四组试管分别作以下处理:

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(4)将Al和Bl试管中溶液加入到E1试管中,A2和B2溶液加入到E2试管中,A3和B3溶液加入到E3试管中.C、D试管中的溶液均加入到F试管中,立即将E1、E2、E3、F试管在40℃水浴锅中保温一段时间。然后分别加入2mL斐林试剂,并经过60℃水浴中加热2min后,观察颜色变化。

[结果分析]将E1、E2、E3试管中的颜色与________试管进行比较得出麦芽糖溶液浓度,并计算出α-淀粉酶催化效率前平均值。

[讨论]①实验中F试管所起的具体作用是排除________对实验结果的干扰,从而对结果进行校正。②若要测定β-淀粉酶的活性,则需要对步骤二进行改变,具体的操作是将淀粉酶溶液_________,从而获得β-淀粉酶。

 

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