Question

（10分）人组织纤溶酶原激活物（htPA）是一种重要的药用蛋白，可在转htPA 基因母羊的羊乳中获得。流程如下：

（1）htPA 基因与载体用_______________________切割后，通过___________连接，以构建重组表达载体。检测目的基因是否已插入受体细胞DNA，可采用_________________________技术。

（2）为获取更多的卵（母）细胞，要对供体母羊注射促性腺激素，使其_______________。采集的精子需要经过__________________，才具备受精能力。

（3）将重组表达载体导入受精卵常用的方法是_________________。为了获得母羊，移植前需对已成功转入目的基因的胚胎进行___________________。利用___________和胚胎移植技术可获得多个转基因个体，这体现了早期胚胎细胞的__________________。

（4）若在转ht-PA基因母羊的羊乳中检测到_________________________，说明目的基因成功表达。

Answer

（1）同种限制性核酸内切酶 DNA连接酶 DNA分子杂交（或核酸探针）

（2）超数排卵 获能（处理）

（3）显微注射法 性别鉴定 胚胎分割 全能性

（4）htPA（或人组织纤溶酶原激活物）

【解析】

试题分析：（1）构建重组表达载体时，htPA 基因（目的基因）与载体需用同种限制性核酸内切酶切割，然后用DNA连接酶连接。检测目的基因是否已插入受体细胞DNA，可采用DNA分子杂交技术。

（2）为获取更多的卵（母）细胞，要对供体母羊注射促性腺激素，使其超数排卵。采集的精子需要经过获能处理，才具备受精能力。

（3）将重组表达载体导入动物受精卵常用的方法是显微注射法。为了获得母羊，移植前需对已成功转入目的基因的胚胎进行性别鉴定。利用胚胎分割和胚胎移植技术可获得多个转基因个体，体现了早期胚胎细胞的全能性。

（4）若在转ht-PA基因母羊的羊乳中检测到htPA（或人组织纤溶酶原激活物），说明目的基因成功表达。

考点：本题考查基因工程和胚胎工程的相关知识，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，形成知识网络的能力。