Question

饲养动物常用的植物饲料中含有难溶的植酸钙等物质，很难被动物吸收利用，还影响对其他营养物质的利用｡若在饲料中添加植酸酶，则能催化其水解成为可以吸收利用的磷酸盐等｡以下是科研人员从作物根部土壤中分离产植酸酶的菌株的过程示意图｡请分析作答｡

（1）培养基中除了添加    以外，应含有碳源、氮源、水、无机盐等基本营养物质｡

（2）为防止杂菌污染，要对培养基和培养皿等进行    ｡接种后须将培养皿呈    状态放置｡

（3）接种以前要进行的一系列操作，目的是在固体培养基表面形成    ｡根据土壤样品的稀释倍数和接种稀释液的体积，统计平板上的    就能大致推测出样品中的活菌数｡通常每种稀释液需涂布    个平板，取其平均值｡若将最后一个试管中的菌液每次吸取0.1mL涂布培养后获得平均值是C，则1g土壤中含有此菌的菌株数是    ｡

（4）若要对上述菌株进行纯化，通常使用的划线工具是    ;接种时，在第一区域划线后须将该工具    后再划线，在第二次划线时须从第一次划线的末端开始，这样做的目的是从上一区域获得菌种。

（5）产植酸酶的菌株会水解植酸钙，菌落的周围将形成透明的区域，根据透明区域的有无，可初步判断该菌是否产植酸酶｡实验结果显示A~E五种菌株中，    是产植酸酶最理想的菌株｡

Answer

⑴ 植酸钙

⑵ 灭菌 倒置

⑶ 单个菌落 菌落数 3 C×106（2分）

⑷ 接种环 灼烧、冷却

⑸ E

【解析】

试题分析：

（1）因为要分离产植酸酶的菌株，故培养基要添加植酸钙，还要有碳源、氮源、水、无机盐等基本营养物质｡

（2）防止杂菌污染，要对培养基和培养皿等进行灭菌。接种后须将培养皿呈倒置状态放置，防止凝结在皿盖上的水蒸气流到培养基表面导致染菌，有利于菌种利用培养基营养，加快生长速度。

（3）接种所用的平板划线法和稀释涂布法，目的都是在培养基表面形成单个菌落。根据土壤样品的稀释倍数和接种稀释液的体积，统计平板上的菌落数就能大致推测出样品中的活菌数｡通常每种稀释液需涂布3个平板，取其平均值｡将最后一个试管中的菌液每次吸取0.1mL涂布培养后获得平均值是C，则1g土壤中含有此菌的菌株数是C×106。

（4）对上述菌株进行纯化，通常使用的划线工具是接种环。在第一区域划线后须将该工具灼烧灭菌 后再划线。

（5）E菌株菌落的周围形成透明的区域最大，表明水解植酸钙能力最强，为产植酸酶最理想的菌株｡

考点：本题考查微生物培养与运用相关知识，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，形成知识的网络结构能力。