Question

（15分）【生物——生物技术实践】酿酒厂常用酸性脲酶去除酒精类饮品中的尿素，以改善酒精类饮品的品质。请回答下列问题：

（1）从土壤中筛选酸性脲酶生产菌，其培养基的主要成分有葡萄糖、尿素、琼脂等，从功能上分析，该培养基属于_____________培养基。该培养基的氮源来自____________。

（2）筛选和纯化酸性脲酶生产菌常用的两种接种方法是__________和__________

（3）对同一浓度的酸性脲酶生产菌稀释液，分别用血球计数板计数和稀释涂布平板法计数，若不存在实验误操作，则前者的数量_____（多于／等于／小于）后者，其原因是___________。

（4）若用海藻酸钠固定含酸性脲酶的细菌时，应将海藻酸钠溶液和细胞混合滴入溶液中。右表是不同浓度海藻酸钠形成的凝胶珠状况，从表中看出，海藻酸钠的浓度应选用____________g／dL。若利用固定化酶技术，它的优点是_________________。

海藻酸钠质量浓度（g/dL）	凝胶强度	凝胶气泡量	成球难度	凝珠形状
1.0	中	没有	较易	扁圆形
2.0	中	少量	易	圆球形
3.0	强	较多	稍难	有托尾
4.0	强	大量	难	难成球形

Answer

（除注明外，每空2分）

（1）选择 尿素

（2）平板划线法 稀释涂布平板法

（3）多于 有些菌落连接在一起，计数偏小

（4） 2.0（1分） 可重复利用，且利于产物的纯化

【解析】（1）由题意“培养基的主要成分有葡萄糖、尿素、琼脂等”可知，尿素是唯一的氮源，只有能够分解尿素的细菌才能在该培养基上生长繁殖，因此从功能上分析，该培养基属于选择培养基。

（2）最常用的微生物的接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法。

（3）使用稀释涂布平板法进行微生物计数时，当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，即有些菌落连接在一起，计数偏小，所以用血球计数板计数的数量多于用稀释涂布平板法计数的数量。

（4）若用海藻酸钠固定含酸性脲酶的细菌时，海藻酸钠形成的凝胶珠应为圆球形，分析表中信息可知，海藻酸钠的浓度应选用2.0 g／dL。固定化酶技术的优点是：可重复利用，且利于产物的纯化。

【考点定位】微生物的培养与应用，固定化酶技术。