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肺细胞中的let﹣7基因表达减弱,癌基因RAS表达增强,会引发肺癌.研究人员利用基因工程技术将let﹣7基因导入肺癌细胞实验表达,发现肺癌细胞的增殖受到抑制.该基因工程技术基本流程如图1.

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请回答:

(1)进行过程①时,需用      酶切开载体以插入let﹣7基因.载体应用RNA聚合酶识别和结合的部位,以驱动let﹣7基因转录,该部位称为     

(2)进行过程②时,需用      酶处理贴附在培养皿壁上的细胞,以利于传代培养.

(3)研究发现,let﹣7基因能影响RAS的表达,其影响机理如图2.据图分析,可从细胞提取      进行分子杂交,以直接检测let﹣7基因是否转录.肺癌细胞增殖受到抑制,可能是由于细胞中      (RASmRNA/RAS蛋白)含量减少引起的.

 

(1)限制性核酸内切酶(或限制)启动子 (2)胰蛋白 (3)RNA RAS蛋白 【解析】 试题分析:根据题意和图示分析可知: 图1表示利用基因工程技术将let一7基因导入肺癌细胞的流程,其中①表示基因表达载体的构建过程;②表示用胰蛋白酶处理组织细胞,使之成为单个细胞,再加细胞悬液进行细胞培养的过程. 图2表示let﹣7基因影响癌基因RAS的表达的原理,let﹣7基因转录产物miRNA与RAS基因转录产物RAS mRNA结合,使RAS基因翻译受到抑制,引起细胞中的RAS蛋白含量减少,进而导致癌细胞增殖受到抑制. 【解析】 (1)过程①表示基因表达载体的构建,在该过程中需要用限制性核酸内切酶对载体进行切割,以便于目的基因的插入;启动子是一段特殊的DNA序列,是RNA聚合酶识别和结合的位点,RNA聚合酶结合到该位点,可驱动转录过程. (2)过程②表示动物细胞培养,培养过程中出现接触抑制后可以用胰蛋白酶处理,使之分散成单个的细胞,之后分装到其他培养瓶里面进行传代培养. (3)判断目的基因是否在受体细胞中转录,可用分子杂交技术来检测,从细胞中提取mRNA和用放射性同位素或者荧光标记的目的基因单链DNA片段进行杂交.根据题中信息“肺细胞中的let﹣7基因表达减弱,癌基因RAS表达增强,会引发肺癌”知,导入let﹣7基因后,肺癌细胞的增殖受到抑制;据图2可知,let﹣7基因影响RAS基因表达的机理是:let﹣7基因转录产物miRNA与RAS基因转录产物RAS mRNA结合,使RAS基因翻译受到抑制,引起细胞中的RAS蛋白含量减少,进而导致癌细胞增殖受到抑制. 故答案为: (1)限制性核酸内切酶(或限制)启动子 (2)胰蛋白 (3)RNA RAS蛋白 考点:基因工程的原理及技术.  
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某校学生在开展研究性学习时,进行了人类遗传病方面的调查研究.

图是该校学生根据调查结果绘制的某种遗传病的系谱图(基因用A、a表示).请根据图分析回答:

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(2)Ⅲ7号个体婚前应进行      ,以防止生出有遗传病的后代.若要调查该病在人群中的发病率,需要保证①.      ,②调查群体足够大.

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