Question

Ⅰ、研究者从热泉中筛选了高效产生高温淀粉酶的嗜热菌，其筛选过程如下图所示。

 

（1）、①过程称为    ，②过程是为了    。在1号培养基上挑出能产生淀粉酶的嗜热菌菌落的鉴别方法是培养基上会出现以该菌的菌落为中心的               。

（2）、按功能分Ⅰ号培养基称为    ；该培养基中必须添加的成分有    等。

A．琼脂    B．葡萄糖   C．硝酸铵   D．淀粉

（3）、一般对配制的培养基采用高压灭菌，其中“高压”是为了                     。

Ⅱ、下图为单克隆抗体制备过程的示意图

4、若只考虑细胞的两两融合，试管中有_____种融合细胞，筛选后进一步培养的是_____细胞，此细胞的特点是_____________。

5、相对细菌而言，动物细胞离体培养更需关注培养基的渗透压，这是因为动物细胞（      ）

A．渗透压远高于细菌或植物细胞的渗透压

B．没有成熟大液泡，渗透压调节能力差

C．没有细胞壁，对培养基的渗透压更敏感

D．生长缓慢，各生长阶段对环境的渗透压要求不同

6、已知细胞合成DNA有D和S两条途径，其中D途径能被氨基嘌呤阻断。人淋巴细胞中有这两种DNA的合成途径，但一般不分裂增殖；鼠骨髓瘤细胞中没有S途径，但能不断分裂增殖。写出过程I分离筛选出杂种细胞的方法                         。

Answer

（1）、稀释 筛选获得单个菌落 透明圈

（2）、选择培养基 ACD

（3）、杀死培养基中的细菌芽孢

（4）、3 骨髓杂交瘤细胞 既能产生单一抗体，又能体外快速增值

（5）、C

（6）、培养液中加入氨基嘌呤，收集增殖的细胞

【解析】

Ⅰ、（1）图示可见，①过程是稀释嗜热菌培养液的过程，接种嗜热菌即②过程常用稀释涂布平板法，目的是为了筛选到单个菌落．

（2）据图中信息分析，Ⅰ号培养基属于选择培养基；由于要筛选出耐高温的嗜热菌，接种后应将培养基放置于高温恒温培养箱中培养，淀粉为其提供碳源，还需要氮源，硝酸铵可以提供．

（3）灭菌的目的就是要杀灭所有微生物．包括芽孢和孢子

（4）人淋巴细胞和鼠骨髓瘤细胞混合培养，只考虑细胞两两融合，有三种融合细胞，即淋巴细胞自身融合形成的细胞、骨髓瘤细胞自身融合形成的细胞、杂交瘤细胞．筛选后进一步培养的是骨髓杂交瘤细胞

（5）动物细胞无细胞壁，培养液渗透压较低时，动物细胞会吸水涨破，而植物细胞和细菌细胞含有细胞壁，则不会出现吸水涨破的情况，所以动物细胞培养基要特别关注渗透压。

（6）（3）在培养液中加入氨基嘌呤，培养后收集增殖细胞．加入氨基嘌呤后，使D合成途径阻断，仅有D全合成途径的骨髓细胞及其彼此融合的细胞就不能增殖，淋巴细胞一般不分裂增殖．因此培养液中加入该物质后，不能生长的细胞有骨髓瘤细胞、融合的淋巴细胞、融合的骨髓瘤细胞、淋巴细胞．人淋巴细胞和骨髓癌细胞融合后的杂种细胞中可以利用淋巴细胞中的S途径合成DNA而增殖，因此只有杂种细胞能生长。

【考点定位】微生物的分离和培养；培养基对微生物的选择作用、单克隆抗体的制备过程

【名师点睛】1、人淋巴细胞和鼠骨髓瘤细胞混合培养，只考虑细胞两两融合，有三种融合细胞，即淋巴细胞自身融合形成的细胞、骨髓瘤细胞自身融合形成的细胞、杂交瘤细胞．2、为了筛选出杂交瘤细胞，除去其他细胞，可向培养液中加入氨基蝶呤，使D合成途径阻断，仅有该合成途径的骨髓瘤细胞及其彼此融合的瘤细胞就不能增殖，但人淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合后的杂种细胞可以利用淋巴细胞中的S途径合成DNA而增殖