Question

在培育转基因植物的研究中，卡那霉素抗性基因（kan）常作为标记基因，只有含卡那霉素抗性基因的细胞才能在卡那霉素培养基上生长。下图为获得抗虫棉的技术流程。

请据图回答：

（1）A过程需要的酶有          和           。

（2）B过程及其结果体现了质粒作为运载体必须具备的两个条件是____________和            。

（3）B、C过程的培养基除含有必要营养物质、琼脂和激素外，还必须加入________________。

（4）如果利用DNA分子杂交原理对再生植株进行检测，D过程应该用                作为探针。

（5）科学家发现转基因植株的卡那霉素抗性基因的传递符合孟德尔遗传规律。

①将转基因植株与              杂交，其后代中抗卡那霉素型与卡那霉素敏感型的数量比为1：1。

②若该转基因植株自交，则其后代中抗卡那霉素型与卡那霉素敏感型的数量比为________。

③若将该转基因植株的花药在卡那霉素培养基上作离体培养，经加倍后则获得的再生植株群体中抗卡那霉素型植株占_________%。

Answer

（每空1分，共9分）

（1）限制性内切酶和DNA连接酶

（2）具有标记基因；能在宿主细胞中复制并稳定保存

（3）卡那霉素 （4）放射性同位素（或荧光分子）标记的抗虫基因

（5）①非转基因植株 ②3: 1 ③100

【解析】

（1）构建基因表达载体的酶有限制酶和DNA连接酶。

（2）质粒作为运载体必须具备的两个条件是：具有标记基因；能在宿主细胞中复制并稳定保存。

（3）诱导选择的培养基中需加入标记基因控制的物质卡那霉素。

（4）基因探针应选择检测的基因。

（5）由于转基因植株是杂合子，所以转基因植株与隐性非转基因植株杂交，其后代比例为1:1。自交后代性状分离比为3：1。由于卡那霉素培养基可选择出含有抗卡那霉素型植株，所以最终获得的抗卡那霉素植株占100%。

【考点定位】基因工程的原理及技术

【名师点睛】基因工程技术将抗虫基因导入离体棉花叶片组织，其过程为：获取目的基因（抗虫基因）→构建基因表达载体→将目的基因导入农杆菌→用含有卡那霉素的选择培养基筛选含有重组质粒的土壤农杆菌→利用农杆菌转化法将目的基因导入离体棉花叶片组织细胞。其次采用植物组织培养技术，将导入抗虫基因的细胞培养成转基因抗虫植株，其过程主要包括脱分化和再分化两个步骤。