Question

（1）癌症是威胁人类健康的最严重的疾病之一。细胞癌变后，细胞表面的糖蛋白减少，使细胞粘着性降低，但增加了一些癌细胞特有的蛋白成分，所以可用          的方法来鉴定细胞是否癌变。

（2）丹参酮是从中药丹参中提取的具有抗肿瘤活性的脂溶性菲醌化合物，其作用机制之一是诱导细胞凋亡。以下是相关的实验研究过程及结果：

①将等量的人肝癌细胞（HepG2）悬液，分别接种于若干含有等量培养液的培养瓶中；将培养瓶放于37℃、         （气体条件）培养箱中培养24h，静置、去掉上清液；

②实验组用0．02%二甲亚砜溶解的0．5ug/mL、1ug/mL、1．5ug/mL的丹参酮溶液，对照组用         ，再加入等量的培养液，在适宜环境条件下中继续培养；

③培养72h，每24h用细胞计数仪检测癌细胞数。本实验的自变量是        。为减少误差，实验中每组细胞培养瓶不止一个，统计每组各瓶数据并          。

（3）设对照组癌细胞增殖率为100%，用下面公式计算各用药组癌细胞增殖率：增殖率（%）=[（用药组各时段癌细胞数一用药组开始癌细胞数）/（对照组各时段癌细胞数一对照组开始癌细胞数）]×100。得到以下数据：

组别	培养时间（小时）
24	48	72
对照组	100	100	100
给药组 Ug/mL	0．5	78	62	48
1．0	68	36	21
1．5	48	12	5

通过数据分析可以得出丹参酮对HepG2细胞的作用效果的特点是：              。

（4）将培养48h的培养液离心，去除上清液后经过一系列的处理及分析，得到对照组和给药组48h细胞周期变化、凋亡率及凋亡蛋白Bax和Bcl-2的表达量如表2所示：

组别	G1	S	G2+M	凋亡率	Bax	Bcl-2
对照组（%）	55	36	9	5．6	28	53
实验组（%）	67	24	9	32．6	37	38

据此推测，丹参酮使HepG2细胞周期阻滞于       期。丹参酮可能通过促进HepG2内的

        表达来诱导细胞凋亡从而抑制肿瘤的生长。

（5）顺铂（DDP）是一种DNA损伤药物，也是目前临床上多种癌症化疗的首选药物。若要探究丹参酮联合顺铂对HepG2细胞生长的影响，除了上述丹参酮给药组外，还应设置       

        等给药组才能得出结论。

Answer

（共15分）（1）抗原-抗体杂交

（2）①5%的二氧化碳和95%的空气 ②等量的0．02%二甲亚砜溶液 丹参酮的浓度与作用时间 求平均值

（3）丹参酮浓度越高，对细胞生长的抑制作用越强；作用时间越长，对细胞生长的抑制作用越强

（4）G1 Bax基因

（5）顺铂用药组和丹参酮联合顺铂用药组

【解析】（1）鉴定癌细胞特有的蛋白成分，可采用抗原-抗体杂交的方法。

（2）①在进行动物细胞培养时，通常将培养皿或松盖培养瓶至于含5%的二氧化碳和95%的空气的混合气体的培养箱中培养。

②实验组用0．02%二甲亚砜溶解的0．5ug/mL、1ug/mL、1．5ug/mL的丹参酮溶液，为了保证单一变量原则，且排除溶剂的作用，对照组应用等量的0．02%二甲亚砜溶液。

③由题意“用0．02%二甲亚砜溶解的0．5ug/mL、1ug/mL、1．5ug/mL的丹参酮溶液”和“培养72h，每24h用细胞计数仪检测癌细胞数”可知，本实验的自变量是丹参酮的浓度与作用时间。为了减少实验误差，在实验中，每组细胞培养瓶应不止一个，在统计每组各瓶数据后需求平均值。

（3）表中信息显示：癌细胞的增殖率随着丹参酮浓度的增大和培养时间的递增而逐渐减小，说明丹参酮浓度越高，对细胞生长的抑制作用越强；丹参酮作用时间越长，对细胞生长的抑制作用越强。

（4）分析表格信息可知：实验组的G1期细胞比例增多，S期细胞的比例减少，据此可推测：丹参酮使HepG2细胞周期阻滞于G1期。表中信息还显示：实验组的细胞凋亡率增加，凋亡蛋白Bax的表达量也增多，据此可推测：丹参酮可能通过促进HepG2内的bax基因表达来诱导细胞凋亡从而抑制肿瘤的生长。

（5）若要探究丹参酮联合顺铂对HepG2细胞生长的影响，应还需设置顺铂用药组和丹参酮联合顺铂用药组给药组才能得出结论。

【考点定位】动物细胞培养、恶性肿瘤防治及其相关的实验设计