Question

【加试题】回答下列（一）（二）小题

(一）在农村，泡菜的制作方法是：先对新鲜的蔬菜进行整理、清洁，然后放入彻底清洗并用白酒擦过的泡菜坛中，再向坛中加入盐水、香辛料及一些“陈泡菜水”。密封后置于阴凉处，适宜环境温度为28～30°C。请回答：

(1)用白酒擦拭泡菜坛的目的是_____________。

(2)此过程中起主要作用的微生物是_____________(A.乳酸菌+假丝酵母B.乳酸菌+醋化醋杆菌C.酵母菌+霉菌D.酵母菌+醋化醋杆菌），这些微生物利用蔬菜中的糖类和其他物质进行发酵，产物有_________等，其中也包括亚硝酸。

(3)某同学想测定制作的泡菜中亚硝酸盐的含量，需要先用亚硝酸钠标准溶液绘制___________，再通过测定泡菜匀浆的_____________讲行计算。

(4)若要获得优良乳酸菌菌种，纯化菌种时,更易分离得到单菌落的接种方法是___________，培养时还需提供___________条件。

(二）干扰素是抗病毒的特效药，干扰素基因缺失的个体，免疫力严重下降。科学家设计了以下流程，利用胚胎干细胞（ES细胞）对干扰素基因缺失的患者进行基因治疗。请回答：

(1)上图中进行的是___________(填“体内”或“体外”)基因治疗，①过程中利用的生物工程技术手段称为______________。若导入的干扰素基因序列为巳知，则可通过___________获取。

(2)ES细胞是由囊胚中的___________分离出来的一类细胞，具有_________性,可以将其培养成人体各种组织器官。在培养过程中常被用作饲养层细胞的一般是___________。

(3)下列关于上述操作中的叙述正确的是___________。

A.①②操作体现了上皮细胞具有全能性

B.③过程可以用农杆菌转化法进行基因导入

C.完成基因导入的细胞就具有了合成并分泌干扰素的能力

D.基因治疗依据的变异原理是基因重组

Answer

消毒（消除杂菌）A有机酸和醇类（漏写、错写不给分）标准曲线光密度值（OD值）涂布分离法无氧体外核移植技术化学方法合成内细胞团发育全能胚胎成纤维细胞D

【解析】

试题分析：(一）泡菜制作是应用了乳酸菌的发酵原理，提供的新鲜蔬菜是它的培养基。乳酸菌是厌氧微生物，在缺氧的环境条件下发酵可产生大量乳酸，能抑制其他厌氧菌的生存；在有氧情况下，自身受抑制，不能进行乳酸发酵，需氧菌繁殖而变质。乳酸菌生长繁殖需要消耗有机物，发酵过程中会产生更多种类的有机物。乳酸菌属异养厌氧型，培养基中应有碳源、氮源、生长因子、水、无机盐五大营养，需要的培养条件主要有适宜的温度(28 ℃～30 ℃)、无氧环境，这样菌种才能大量增殖。(二）分析题图：图示是利用胚胎干细胞（ES细胞）对干扰素基因缺失小鼠进行基因治疗的流程，其中①表示获得重组胚胎的过程；②表示早期胚胎培养过程；③表示采用基因工程技术将目的基因导入受体细胞，④表示进行体外诱导获得造血干细胞，⑤表示将获得的含有目的基因的造血干细胞移植到患者体内。

(一）（1）在泡菜制作过程中要对器具进行消毒，防止杂菌污染，所以要用白酒擦拭泡菜坛。

（2）泡菜制作是应用了发酵原理，主要菌种是乳酸菌和假丝酵母，利用蔬菜中的糖类和其他物质进行发酵，产物有有机酸和醇类等，其中也包括亚硝酸。

（3）测定制作的泡菜中亚硝酸盐的含量实验中，需要先用亚硝酸钠标准溶液绘制标准曲线，再通过测定泡菜匀浆的光密度值（OD值）讲行计算。

（4）纯化菌种常用的方法有平板划线法和稀释涂布平板法,其中稀释涂布平板法更易分离得到单菌落，乳酸菌是厌氧菌，所以培养时还需提供无氧条件。

(二）（1）分析图解可知，上图中进行的是体外基因治疗过程。①过程表示获得重组胚胎的过程，利用了核移植技术。若导入的干扰素基因序列为巳知，则可通过人工化学合成法获取。

（2）ES细胞是由是由囊胚中的内细胞团分离出来的一类细胞，利用其具有（发育的）全能性，可以将其培养成人体各种组织器官。在培养过程中常被用作饲养层细胞的一般是胚胎成纤维细胞。

（3）细胞体现全能性必须发育成完整的个体，而图中①②操作获得是早期胚胎，不能体现了上皮细胞具有全能性，A错误；农杆菌转化法一般用于植物基因导入，B错误；基因是选择性表达的，完成基因导入的细胞不一定就具有了合成并分泌干扰素的能力，C错误；基因治疗依据的变异原理是基因重组，D正确。

【点睛】本题考查利用微生物发酵来生产特定的产物以及微生物的应用、微生物培养、基因工程、细胞工程的相关知识，要求能理解所学知识的要点，将知识运用于实践中，把握知识之间内在联系，综合分析知识、形成知识网络结构的能力。