Question

乳酸菌是人和动物体胃肠道中的有益菌，能助消化，利于肠道健康，但是消化道中胆汁所含的胆盐会对乳酸菌的生理活动由抑制作用，为此，研究人员通过辐射处理野生型乳酸菌，得到耐高浓度胆盐的乳酸菌。

（1）与腐乳制作所用微生物相比，乳酸菌在结构上的主要特点是________。

（2）实验步骤：

①育种与培养：辐射处理后可得到多种类型的乳酸菌，置于经过_____法灭菌处理的______（固体/液体）培养基中，37℃振荡培养。

②接种与选择：为避免培养液中菌体浓度过高，需将培养液进行_____处理。之后，将菌液涂布接种于含0.3%胆盐和不含胆盐的固体培养基上，配置时为了使培养基凝固，应向培养基中加入______；置于37℃条件下_____（密闭/充气）培养；设置不含胆盐的培养基培养的目的是_______。

③筛选与纯化:从平板中提取实验效果明显的目的菌株,采用_____法接种于新的培养基平板,可对菌株进一步纯化。

Answer

无核膜包被的成形细胞核高压蒸汽灭菌液体系列稀释（或“梯度稀释”）琼脂密闭对照平板划线

【解析】（1）腐乳制作所用微生物主要是毛霉，毛霉属于真核生物中的真菌，乳酸菌属于原核生物中的细菌，原核细胞和真核细胞在结构上的主要特点是无核膜包被的成形细胞核；

（2）①培养基一般用高压蒸汽灭菌法进行灭菌，而培养辐射处理后可得到多种类型的乳酸菌，置于液体培养基中，37℃震荡培养；

②为避免培养液中菌体浓度过高，需将培养液进行系列稀释（或“梯度稀释”）处理．之后，将菌液涂布接种于含0.3%胆盐和不含胆盐的固体培养基上，配置时为了使培养基凝固，应加入琼脂作为凝固剂；由于乳酸菌属于异养厌氧型，因此需要置于37℃条件下密闭培养．不含胆盐的培养基培养的目的是对照；

③从平板中提取实验效果明显的目的菌株，采用平板划线法接种于新的培养基平板，可对菌株进一步的纯化。

【点睛】

从混合样品中获得某种微生物的方法通常有两种：

第一种是可利用该分离对象对某一营养物质有一“嗜好”的原理，专门在培养基中加入或不加该营养物质，从而使它成为一种选择培养基（如在含高浓度NaCl的培养基上分离金黄色葡萄糖球菌，在不含N的培养基上分离圆褐固氮菌）；或根据分离对象对pH、温度和氧气浓度的喜好，改变培养环境的理化性质，使环境条件最适宜该微生物的生存，从而达到分离的目的，将培养基放在高温环境中培养只能得到耐高温的微生物；

第二种办法可利用该分离对象对某种抑菌物质的抗性，在混合培养物中加入该抑制物，经培养后，原来占优势的微生物生长受抑制，而分离对象却可乘机大大增殖，使之在数量上占优势（如在加入青霉素的培养基上分离真核微生物）。