Question

金黄色葡萄球菌具有高度耐盐性，在血平板(培养基中添加适量血液)上生长时，可破坏菌落周围的红细胞，使其褪色。下面是某研究小组测定自来水中金黄色葡萄球菌浓度的实验操作。请回答下列问题：

（1）金黄色葡萄球菌的培养基为7.5％NaCl牛肉膏蛋白胨培养基，根据实验目的应选择_______（填“固体”、“液体”）培养基，培养基中加入7.5％NaCl的作用是_____________。

（2）在制作血平板时需等平板冷却后，方可加入血液，以防止_____________________。血平板在使用前，需置于恒温培养箱中适宜温度下培养一段时间的目的是___________。

（3）取10mL自来水样，加入_____________稀释成10^-1的自来水样，依次操作，制作稀释10^-2、10^-3、10^-4的自来水样。

（4）将0.1 mL 10^-l～10^-4的四个稀释样液，分别接种到4组(每组3个)血平板上的方法是________________。在血平板上，金黄色葡萄球菌菌落的周围会出现________________。若在10^-3组的3个血平板上，金黄色葡萄球菌菌落数分别为42、38和37，则每升自来水中的活菌数约为______________个。

Answer

固体 利于金黄色葡萄球菌的筛选 高温破坏血细胞 检测血平板是否符合无菌要求 90mL无菌水 稀释涂布平板法 透明圈（溶血圈） 3.9×108

【解析】试题分析：结合题意准确提取“筛选金黄色葡萄球菌的原理”，梳理微生物的培养与应用的知识点，即可对相关问题进行解答。

(1)金黄色葡萄球菌在血平板(培养基中添加适量血液)上生长时，可破坏菌落周围的红细胞，使其褪色，据此原理可对金黄色葡萄球菌的进行筛选，因此应选择固体培养基。金黄色葡萄球菌具有高度耐盐性，用7.5％NaCl牛肉膏蛋白胨培养基培养金黄色葡萄球菌时，培养基中加入的7.5％NaCl，不影响金黄色葡萄球菌的生长，但同时可抑制其它菌的生长，因此利于金黄色葡萄球菌的筛选。

(2) 高温会破坏血细胞，因此为了防止高温破坏血细胞，在制作血平板时需等平板冷却后，方可加入血液。血平板在使用前，需置于恒温培养箱中适宜温度下培养一段时间的目的是：检测血平板是否符合无菌要求。

(3) 取10mL自来水样，加入90mL无菌水稀释成10-1的自来水样，依次操作，制作稀释10-2、10-3、10-4的自来水样。

(4)将稀释的样液接种到血平板上进行微生物的纯化培养，所采用的接种方法是稀释涂布平板法。金黄色葡萄球菌可破坏菌落周围的红细胞，使其褪色，因此在血平板上，金黄色葡萄球菌菌落的周围会出现透明圈（溶血圈）。依题意：血平板上生长的平均菌落数＝（42＋38＋37）÷3＝39个，则1 mL自来水中的活菌数约为（C÷V）×M＝（39÷0.1）×1000＝3.9×105个，每升自来水中的活菌数为＝3.9×105×103个＝3.9×108个。