Question

[生物——选修1:生物技术实践]常见的酿酒酵母只能利用葡萄糖而不能利用木糖来进行酒精发酵，自然界中某些酵母菌能分解木糖产生酒精，科学家欲从果园的葡萄上或土壤中分离这种酵母菌，操作如下：

(1)制备酵母菌培养基要进行倒平板操作，待平板冷凝后，要将平板倒置，其主要原因是____________。获得纯净培养物的关键是__________________。

(2)纯化菌株时，通常使用的划线工具是_______________。在第二次及以后划线时，总是从上—次的末端开始划线，这样做的目的是________________。划线的某个平板培养后，第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌落,第二划线区域的第一条线上无菌落，其它划线上有菌落。造成划线无菌落可能的操作失误是_______________________。

(3)将自然界中采集到的葡萄带回实验室，用无菌水将葡萄皮上的微生物冲洗到无菌的三角瓶中，然后将瓶中的液体用涂布器涂布接种于以木糖为唯一_________________的固体培养基上，在适宜的条件下培养一段时间，获得能利用木糖的多个酵母菌____________。实验中所用培养基按功能属于___________培养基。

(4）若要检测土样中的酵母菌含量，应采用__________法。在接种前，随机取若干灭菌后的空白平板培养基先行培养了一段时间，这样做的目的是______________。然后，将lmL土壤溶液稀释分别稀释10倍和100倍，每种稀释度各在3个平板上分别接人0.lmL稀释液，经1适当培养后，6个平板上的菌落数分别为59、57、58、2、7和5，据此可得出每升土壤溶液中的活菌数为________________个。

Answer

防止培养皿盖的冷凝水落入培养基造成污染 防止外来杂菌入侵 接种环 将聚集的菌落逐步减少以获得单个菌落 接种环灼烧后未冷却；划线未从第一区域末端开始 碳源 菌落 选择 稀释涂布平板 检测培养基平板灭菌是否合格 5.8×106

【解析】试题分析：理清微生物的实验室培养与应用、微生物的分离与计数等知识脉络，然后结合题意进行相关试题的解答。

(1) 倒平板操作中，待平板冷凝后将平板倒置，其主要原因是：防止培养皿盖的冷凝水落入培养基造成污染。获得纯净培养物的关键是：防止外来杂菌入侵。

(2) 纯化菌株时，通常使用的划线工具是接种环。在第二次及以后划线时，总是从上—次的末端开始划线，这样做的目的是：将聚集的菌落逐步减少以获得单个菌落。接种环灼烧后未冷却，或划线未从第一区域末端开始，均可造成第二划线区域的第一条线上无菌落，其它划线上有菌落。

(3) 木糖可为微生物的生长提供碳源。在以木糖为唯一碳源的固体培养基上，在适宜的条件下培养一段时间后，可获得能利用木糖的多个酵母菌的菌落。实验中所用培养基按功能属于选择培养基。

(4) 若要检测土样中的酵母菌含量，应采用稀释涂布平板法。在接种前，随机取若干灭菌后的空白平板培养基先行培养一段时间的目的是：检测培养基平板灭菌是否合格 。统计的菌落数应介于30～300之间，所以应选择稀释10倍、菌落数为59、57、58的平板计数，据此可推知：每升土壤溶液中的活菌数为[（59＋57＋58）÷3÷0.1] ×10×103＝5.8×106个。