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基因工程又称基因拼接技术和DNA重组技术,包括以下几个环节:目的基因的获取→基因...

基因工程又称基因拼接技术和DNA重组技术,包括以下几个环节:目的基因的获取→基因表达载体的构建→将目的基因导入受体细胞→目的基因的检测与鉴定。回答下列相关问题:

(1)在基因工程中,获取目的基因主要有两大途径,即____________和从生物材料中分离。如果利用某植物为材料,同时构建cDNA文库和基因组文库,两者相比cDNA文库中含有的基因数目比基因组文库中的__________(多/少)。

(2)在构建基因表达载体时,经常使用质粒载体作为基因工程的工具,其应具备的基本条件有__________(答出两点即可)。除满足上述基本条件外,还需具有启动子和终止子。启动子是__________酶识别并结合的部位。这一步骤中通常还会利用到DNA连接酶,常见的有E·coliDNA连接酶和T4DNA连接酶,其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是__________

(3)将目的基因导入受体细胞时,如果受体为植物细胞,采用最多的方法是__________,如果受体为动物细胞,采用最多的方法是__________

(4)最后,要检测转基因生物的DNA上是否插入了目的基因,经常采用的检测方法是_______________

 

人工合成 少 能够自我复制、具有标记基因、具有一个至多个限制酶切割位点 RNA聚合 T4DNA连接酶 农杆菌转化法 显微注射技术 DNA分子杂交技术 【解析】试题分析:1、基因文库是指将含有某种生物不同基因的许多DNA片段,导入到受体菌的群体中储存,各个受体菌分别含有这种生物的不同基因。基因组文库包含某种生物所有的基因;部分基因文库包含某种生物的部分基因,如cDNA文库。 2、基因表达载体的构建: ①过程:用同一种限制酶切割目的基因和运载体,再用DNA连接酶将目的基因和运载体连接形成重组DNA分子; ②目的:使目的基因在受体细胞中稳定存在并且可以遗传给下一代并表达和发挥作用; ③基因表达载体的组成:目的基因+启动子+终止子+标记基因。 3、将目的基因导入受体细胞:根据受体细胞不同,导入的方法也不一样.将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法;将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法;将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法. 4、目的基因的检测与鉴定:(1)分子水平上的检测:①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术;②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术;③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术;(2)个体水平上的鉴定:抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。 (1)在基因工程中,获取目的基因主要有两大途径,即人工合成和从生物材料中分离。人工合成可通过反转录法或人工化学合成法,含有的基因数目比基因组文库中的少。 (2)质粒作为基因工程常用载体必须具备的条件是能够自我复制、具有标记基因、具有一个至多个限制酶切割位点。基因表达载体的组成有目的基因+启动子+终止子+标记基因,其中启动子是RNA聚合的识别位点。常见的DNA连接酶有E·coliDNA连接酶和T4DNA连接酶,其中T4DNA连接酶既能连接黏性末端又能连接平末端。 (3)将目的基因导入植物细胞常用的方法是农杆菌转化法;将目的基因导入动物细胞常用的方法是显微注射法。 (4)检测目的基因是否导入成功一般用基因探针,技术是DNA分子杂交技术,原理是碱基互补配对原则。 【点睛】本题考查基因工程的相关知识,意在考查考生能运用所学知识与观点,通过比较、分析与综合等方法对某些生物学问题进行解释、推理,做出合理的判断或的能力。还要知道,将目的基因导入微生物细胞.原核生物作为受体细胞的原因是繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对较少,最常用的原核细胞是大肠杆菌,其转化方法是:先用Ca2+处理细胞,使其成为感受态细胞,再将重组表达载体DNA分子溶于缓冲液中与感受态细胞混合,在一定的温度下促进感受态细胞吸收DNA分子,完成转化过程。  
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水质细菌学检验是培水和污水水质分析工作中的一项重要指标。作为水质日常检测的七项指标(色度、浊度、细菌总数、大肠菌群、余氯、铁、锰)之一的细菌总数和大肠杆菌指数,能非常直观地反映水费细菌污染的程度。例如,我国饮用水标准规定,每升饮用水中大肠杆菌不超过3个。某学校生物兴趣小组欲通过实验来检测自来水中大肠杆菌的含量,已知大肠杆菌在伊红—美蓝培养基培养时,菌落呈深紫色。请根据下列有关实验步骤回答问题:

(1)配制培养基:配置伊红—美蓝培养基时,除水、无机盐、蛋白胨、乳糖、伊红、美蓝等基本原料外,还需要加入__________作为凝固剂。从功能上讲,这种培养基属于__________________

(2)倒平板:配置好的培养基用_________法灭菌后,待培养基冷却到50℃左右倒平板。平板冷凝后应将平板__________放置,以防止皿盖上的水珠落入培养基。在接种之前,要随机选取若干灭菌后的空平板先行培养一段时间,这样做的目的是__________

(3)接种:该小组采用平板划线法分离自来水中的细菌,操作时,接种环通过_________灭菌,在第二次及以后划线时,总是从上一次的末端开始划线。这样做的目的是_________。培养一段时间后,能正确表示该小组得到的结果为上图中的_________

 

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已知某二倍体植物在自然情况下自花传粉和异花传粉皆可,该植物的红花(A)对白花(a)为显性,高茎(B)对矮茎(b)为显性,两对等位基因分别位于两对同源染色体上。某小组欲利用现有两纯合品种甲(红花高茎)、乙(白花矮茎)来培育红花矮茎新品种,设计了如下操作:先让甲乙进行杂交获得F1植株,再让F1植株自交得到F2,从F2中筛选出红花矮茎的植株,让其连续自交多代,直至不发生性状分离。

(1)上述培育红花矮茎新品种所利用的的育种方法是___________。理论上,F2红花矮茎植株中能稳定遗传的占___________

(2)该小组经过多次重复试验,发现F2中各种植株的表现型比例与理论情况不一致,结果都接近红花高茎:红花矮茎:百花高茎:百花矮茎=7:3:1:1。

他们提出一种假设:基因型为___________的雄或雌配子致死。

为了验证其假设是否成立,该小组用F1植株与乙为亲本,分别进行了正反交试验并统计子代植株表现型,以子代植株中是否出现表现型为___________的植株为判断标准。

正交:F1(♂)×乙(♀)          反交:F1(♀)×乙(♂)

①若该表现型植株在正交后代中不出现,反交互代中出现。则假设成立,且致死的为___________(雄/雌)配子;

②若该表现型植株在正交后代中出现,反交互代中不出现。则假设成立,且致死的为___________(雄/雌)配子。

 

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利用稻田水面养鱼,既可获得鱼产品,又可利用鱼吃掉稻田中的害虫和杂草,排泄粪便,翻动泥土促进肥料分解,为水稻生长创造良好条件,一般可使水稻增产一成左右。

(1)若调查该稻田生态系统鲫鱼的种群密度应采用__________,调查时,若重捕计数后操作不当使部分被标记的个体死亡,造成调查结果与实际值相比__________(偏高/偏低/基本无差别)。若调查群落的丰富度,需要统计各样方中__________的数值。

(2)有人尝试用人工合成的性引诱剂诱杀雄性害虫来防治害虫。这种方法的原理是希望能改变害虫的性别比例以改变害虫的________________,来降低种群密度。稻田中经控制后的有害生物,密度与所需的防治成本有关,并影响作物的价值。下图中曲线___________(填“I”或“II”)表示将有害生物控制在不同密度时的作物价值。若将有害生物密度分别控制在图中A、B、C三点,则控制在___________点是收益最小。

 

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如图1为某神经—骨骼肌接头(类似突触)结构示意图。研究发现,当兴奋传导到达神经末梢时,Ca2+通道打开,Ca2+内流,使囊泡中的乙酰胆碱(ACh)被释放到接头间隙中,进而引起骨骼肌细胞膜电位变化,使肌细胞兴奋而诱发一次收缩。

(1)在突触前神经元上给予一个电刺激时,兴奋在神经纤维上传导的时候,局部电流的作用是刺激___________。神经—骨骼肌接头属于反射弧中___________(结构)组成部分,骨骼肌细胞产生动作电位时,膜内发生的电位变化为______________________

(2)为了研究细胞外ATP对突触传递的作用,科研人员给予突触前神经元细胞一个电刺激时,结合图2所示实验结果分析,ATP对Ca2+内流起___________作用。

(3)细胞外钙离子对钠离子存在“膜屏障作用”(即钙离子在膜上形成屏障,使钠离子内流减少)。若在神经—骨骼肌接头处,细胞外钙离子浓度过高,则会对骨骼肌收缩起________________作用。

 

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某种野生型油菜存在一种突变体,叶绿素、胡萝卜素含量均低,其叶片呈现黄化色泽。一定条件下,野生型和突变体的成熟叶片净光合速率、呼吸速率及相关指标见下表。请分析并回答:

 

类型

指标

净光合速率

(μmolCO2•m-2•s-1

胞间CO2浓度

(μmolCO2•m-2•s-1

呼吸速率

(μmolCO2•m-2•s-1

野生型

0.28

6.94

8.13

210.86

4.07

突变体

0.32

9.30

5.66

239.07

3.60

 

(1)提取该植物突变体的光合色素,应在研磨叶片时向研钵中加入______________,使研磨充分。与野生型相比,突变体中发生的改变可能_____________(填“促进”或“抑制”)叶绿素a向叶绿素b的转化。

(2)在上表测定的条件下,突变体成熟叶片中叶绿体消耗CO2的速率比野生型低___________μmolCO2•m-2•s-1。在上表的光照、温度等条件下,突变体油菜CO2饱和点___________(大于、小于、等于)野生型油菜。(注:CO2饱和点是指当空气中的二氧化碳浓度增加到一定程度后,植物的光合速率不会再随着二氧化碳浓度的增加而提高时的二氧化碳浓度。)

(3)突变体油菜种子中脂肪含量为种子干重的70%。为探究突变体油菜种子萌发过程中干重及脂肪的含量变化,某研究小组将种子置于温度、水分(蒸馏水)、通气等条件适宜的黑暗环境中培养,定期检查萌发种子(含幼苗)的脂肪含量和干重,结果表明:脂肪含量逐渐减少,到第11d时减少了90%,干重变化如下图所示。

实验第7d前,导致萌发种子干重增加的主要元素是___________(填“C”、“N”或“O”)如果使萌发种子(含幼苗)的干重增加,必须提供的条件是___________(答两项)。

 

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