Question

（一）生活饮用水的微生物安全性日常检测是很重要的。请回答下列问题：

（1）培养大肠杆菌所用的LB培养基一般用________法灭菌。检验大肠杆菌的含量时，通常将水样用_________进行一系列的梯度稀释

（2）将稀释后的水样分别用玻璃刮刀_______到LB固体培养基，_______于恒温培养箱，在_____℃条件进行培养。用该方法统计样本菌落数时_________（填需要或不需要）设置对照组。

（3）下图表示培养和纯化大肠杆菌的部分操作步骤，下列相关叙述正确的是_________。

A．步骤①倒平板操作时，倒好后应立即将其倒过来放置               

B．步骤②接种环火焰上灼烧后迅速蘸取菌液后划线    

C．步骤③多个方向划线，使接种物逐渐稀释，培养后出现单个菌落

D．步骤④恒温培养箱培养后可用来对大肠杆菌进行计数

（二）科学家通过诱导黑鼠体细胞脱分化获得诱导性多能干细胞（iPS），继而利用iPS细胞培育出克隆鼠。流程如下：

（1）从黑鼠体内获得一部分组织细胞，经过___________消化，使其分散成单个的细胞，然后放入____________中保温培养。在培养过程中细胞保持生长、分裂（繁殖）乃至___________和有规律的衰老、死亡等生命活动现象。

（2）下列关于动物细胞培养的叙述，错误的是___________。

A．二倍体细胞大多具有异倍体核型

B．某些癌细胞在合适条件下能逆转为正常细胞

C．细胞克隆的最基本要求是必须来源于单个细胞

D．未经克隆化培养的细胞系细胞往往遗传性状不均一

（3）图中重组囊胚通过_________技术移入白鼠子宫内继续发育。克隆鼠的遗传物质来自图中______鼠。为了提高成功率，代孕母鼠需进行激素处理，使其________________。

Answer

高压蒸汽灭菌 无菌水 涂布 倒置 37 需要 C 胰蛋白酶（或机械消化和胰蛋白酶） CO2培养箱 接触抑制 A 胚胎移植 黑 同期发情

【解析】试题分析：（一）（二）分别就选修1和3的基本知识进行了考查，注意两部分中题目信息和图文信息的转换。

解析：（一）

（1）培养大肠杆菌所用的LB培养基一般用高压蒸汽法灭菌。检验大肠杆菌的含量时，通常将水样用无菌水进行一系列的梯度稀释，保证无菌条件。

（2）将稀释后的水样分别用玻璃刮刀涂布到LB固体培养基，倒置于恒温培养箱，在37℃条件进行培养。用该方法统计样本菌落数时需要设置对照组。

（3）培养和纯化大肠杆菌时尽可能使大肠杆菌细胞分散成单个，培养出单菌落。A．步骤①倒平板操作时，倒好后应等待冷却凝固5-10分钟后将其倒过来放置，A错；B．步骤②接种环火焰上灼烧后在酒精灯火焰旁等待冷却，再蘸取菌液后划线，B错；C．步骤③多个方向划线，使接种物逐渐稀释，培养后出现单个菌落，C正确；D．平板划线法经过步骤④恒温培养箱培养后不可用来对大肠杆菌进行计数，可以进行鉴别、纯化。稀释涂布平板法可用来计数。D正确。故选C。

（二）

（1）从黑鼠体内获得一部分组织细胞，经过胰蛋白酶或胶原蛋白酶的消化，使其分散成单个的细胞，然后放入中CO2培养箱保温培养。在培养过程中细胞保持生长、分裂（繁殖）乃至接触抑制和有规律的衰老、死亡等生命活动现象。

（2）A．连续培养的细胞系细胞一般都经历了多次培养，少数具有无限增殖能力的细胞，具有异倍体核型，A错；B．细胞癌变是原癌基因和抑癌基因突变引起的；基因基因突变具有不定向的特点，如果癌细胞在合适的条件下发生基因突变，有可能使突变后的原癌基因或抑癌基因变成正常的基因，使细胞失去癌细胞的特点，B正确；C．细胞克隆即细胞分裂，最基本要求是必须来源于单个细胞，C正确 ；D．未经克隆化培养的细胞系是由多个能无限增殖细胞增殖得到的，无限增殖的细胞遗传物质发生了改变，这种改变可能是不相同的，不一定具有相同的性状，D正确。故选A符合题意。

（3）图中重组囊胚通过胚胎移植技术移入白鼠子宫内继续发育。克隆鼠的遗传物质来自图中黑鼠。为了提高成功率，代孕母鼠需进行激素处理，使其同期发情，在这种生理状态下不发生免疫排斥反应。

点睛：（一）在选修1中注重培养基的制备、灭菌、运用。（二）在选修3中考查动物细胞培养的条件和癌细胞的知识，以及胚胎移植的技术操作。意在考查学生将理论与生物学事实联系的能力。