Question

[生物——选修3：现代生物科技专题]下图表示利用羊生产抗凝血酶的过程，图中amp^R表示氨苄青霉素抗性基因，tet^R表示四环素抗性基因，BamH I、Hind Ⅲ、Sma I为三种限制酶及酶切位点，据图回答问题：

（1）通常采用_______技术来扩增获得抗凝血酶基因，其原理是_________，需要_______酶。据图分析，可将目的基因插入________抗性基因中。

（2）质粒的化学本质是______，除质粒外，还有______（至少写出两种）也可以充当载体。

（3）过程①可采用______的方法将重组质粒导入羊受精卵中，可采用_____技术来检测抗凝血酶基因是否转录成功。

Answer

PCR DNA双链复制 热稳定DNA聚合（Taq） 四环素（tetR） DNA（小型环状DNA） 噬菌体的衍生物、动物或植物病毒（答上述两个即可给分） 显微注射 分子杂交

【解析】分析图【解析】
图中目的基因抗凝血酶基因左侧用BamHⅠ切割，右侧用HindⅢ切割或者SamⅠ酶切割；在质粒上只有BamHⅠ和HindⅢ两种酶的切割位点，所以切割目的基因只能选BamHⅠ和HindⅢ切割，且正好插入质粒的tetR基因中。

（1）要获得大量目的基因，通常采用PCR扩增技术扩增，该技术是利用DNA双链复制的原理，在热稳定DNA聚合（Taq）酶的催化下，以特定引物和四种脱氧核苷酸为原料，合成大量目的基因。据图，仅将抗凝血酶基因切割下来，需要在抗凝血酶基因的左侧用BamHⅠ切割，右侧用HindⅢ切割。当抗凝血酶基因和质粒连接成重组质粒后，tetR基因被抗凝血酶基因隔开，即抗凝血酶基因插入到了tetR基因中。

（2）质粒的化学本质是小型环状DNA 。除质粒外，还有噬菌体的衍生物、动物或植物病毒可以作为运载体。

（3）目的基因导入动物细胞——受精卵，方法一般是显微注射法。检测抗凝血酶基因是否转录成功一般采用基因探针进行分子杂交的方法。

【点睛】本题有两个易错点：一是能正确识别不同限制酶的切割位点，从而正确选择限制酶去切割目的基因和质粒；二是注意区别不同检测方法的检测目的：检测目的基因是否导入一般采用DNA分子杂交技术，检测目的基因是否转录一般采用分子杂交技术，检测目的基因是否表达一般采用抗原—抗体杂交技术。