Question

某科研小组利用质粒（图1）和目的基因（图2）构建重组DNA，下列分析正确的是（ ）

A.用限制酶HindII和BamHI切割质粒，可得到2条DNA片段

B.不能用BamHI酶切割质粒和外源DNA的原因是BamHI酶会破坏目的基因和抗性基因

C.构建重组DNA时，需选择限制酶Bcl I和HindIII同时切割质粒和外源DNA

D.导入了重组DNA的细菌能在含四环素的培养基上生长而不能在含氨苄青霉素的培养基上生长

Answer

BCD

【解析】

关于限制酶，考生可以从以下几方面把握：（1）来源：主要从原核生物中分离纯化出来。（2）特异性：能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂。（3）结果：形成黏性末端或平末端。

A、质粒中含有1个限制酶HindⅢ的切割位点，2个限制酶BamHⅠ的切割位点，因此用这两种限制酶切割质粒，可得到3条DNA片段，A错误；

B、用限制酶BamHⅠ切割会破坏质粒上的两种标记基因，也会破坏目的基因，因此不能用BamHⅠ酶切割质粒和外源DNA，B正确；

C、由B选项可知，构建重组DNA时不能用BamHⅠ酶切割质粒和外源DNA，因此为了防止自身环化或反向连接，构建重组DNA时，需选择限制酶BclⅠ和HindⅢ同时切割质粒和外源DNA，C正确；

D、构建基因表达载体时，应该选择限制酶BclⅠ和HindⅢ同时切割质粒和外源DNA，这样会破坏氨苄青霉素抗性基因，但没有破坏四环素抗性基因，因此导入了重组DNA的细菌能在含四环素的培养基上生长而不能在含氨苄青霉素的培养基上生长，D正确。

故选BCD。