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2018年1月,两只克隆小猴“中中”和“华华”登上国际期刊《细胞》,成了举世瞩目...

20181月,两只克隆小猴“中中”和“华华”登上国际期刊《细胞》,成了举世瞩目的大明星。这是世界首例非人灵长类动物的体细胞克隆。它们的诞生意味着以体细胞克隆猴为实验动物模型的时代就此开启。下图是该项技术的流程图,请据图回答问题:

1)图中选择A猴胚胎期而非成年期的成纤维细胞进行培养,其原因是________________。放入培养瓶中的细胞沉降底部后首先会出现______________现象。每一次进行传代培养,应用_________酶处理获得细胞悬液。

2)对B猴使用_________处理,使其超数排卵,收集并选取处于_________时期的卵母细胞用于核移植。

3)为获得更多的“中中”“华华”,可在胚胎移植前对胚胎进行_________

4)“中中”“华华”的诞生意味着以体细胞克隆猴为实验动物模型的时代就此开启,优势之一是同一批克隆猴的遗传背景相同,“中中”“华华”的遗传物质来自于_________

 

胚胎成纤维细胞增殖能力更强,更易于培养 贴壁生长 胰蛋白酶或胶原蛋白酶 促性腺激素 减数第二次分裂中期 胚胎分割 A猴成纤维细胞的细胞核和B喉卵母细胞的细胞质 【解析】 分析图【解析】 图示过程为体细胞克隆过程,取胚胎成纤维细胞的细胞核,对处于减数第二次分裂中期的卵母细胞去核,然后进行细胞核移植;融合后的细胞激活后培养到早期胚胎,再进行胚胎移植,最终得到克隆猴。 (1)胚胎成纤维细胞增殖能力更强,更易于培养,因此选择猕猴胚胎期而非成年期的成纤维细胞进行培养。放入培养瓶中的细胞沉降到瓶底部后会出现(细胞)贴壁生长现象。每一次传代培养时,应用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理获得细胞悬液,再进行传代培养。 (2)对B猴使用促性腺激素处理,使其超数排卵,收集并选取处于减数第二次分裂中期(MⅡ中期)时期的卵母细胞用于核移植。 (3)胚胎移植前对胚胎进行胚胎分割可获得更多的“中中”“华华”。 (4)以体细胞克隆猴作为实验动物模型显著优势之一是同一批克隆猴群的遗传背景相同,图中克隆猴的遗传物质来自于A猴成纤维细胞的细胞核和B猴卵母细胞的细胞质。
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考点分析:
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基因工程中可以通过PCR技术扩增目的基因。回答下列问题:

1)基因工程中所用的目的基因可以从基因文库中获得,也可以在高效表达目的基因的生物组织中提取mRNA,通过_________获得目的基因。

2)目的基因扩增需要引物,所用的引物组成为如图中_________

3)生物体细胞内的DNA复制开始时,解开DNA双链的酶是_________。在体外利用PCR技术扩增目的基因时,使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是_________。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的_________

4PCR扩增时,退火温度的设定是成败的关键。退火温度过高会破坏模板与引物的碱基配对。退火温度的设定与引物长度、碱基组成有关,长度相同但_________的引物需要设定更高的退火温度。

5)目前在PCR反应中使用Taq酶而不使用大肠杆菌DNA聚合酶的主要原因是__________

 

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1是某基因工程中构建重组质粒的过程示意图,载体质粒P0具有氨苄青霉素抗性基因(amp')和四环素抗性基因(tet')。请回答下列问题:


 

1EcoRV酶切位点为…CTA↑TAG…,EcoR V酶切出来的线性载体P1_________未端。

2)用Taq DNA聚合酶进行PCR扩增获得的目的基因片段,其两端分别带有一个腺嘌呤脱氧核苷酸和鸟嘌呤脱氧核苷酸,两端添加不同的核苷酸的主要目的是____________________。载体P1用酶处理,在两端分别添加了碱基为_________的脱氧核苷酸,形成P2P2和目的基因片段在_________酶作用下,形成重组质粒P3

3)为筛选出含有重组质粒P3的菌落,采用含有不同抗生素的平板进行筛选,得到ABC三类菌落,其生长情况如下表(“+”代表生长,“-”代表不生长)。根据表中结果判断,应选择的菌落是_________(填表中字母)类,另外两类菌落质粒导入情况分别是__________________

菌落类型

平板类型

A

B

C

无抗生素

+

+

+

氨苄青霉素

+

-

-

四环素

+

-

+

氨苄青霉素+四环素

+

-

-

 

4)为检测目的基因是否正常表达,可采用_________方法进行鉴定。

 

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下列有关发酵技术在食品加工中应用的叙述,不正确的是(   

A.为了避免杂菌污染,乳酸菌发酵酸奶时在牛奶中添加一定量的抗生素

B.为了提高果酒品质,挑选新鲜葡萄去除枝梗后用蒸馏水反复冲洗再榨汁

C.为了防止果酒变酸,果酒发酵排气时应避免空气进入及发酵引起的温度过高

D.为了降低亚硝酸盐含量,减少泡菜腌制时间和用盐量

 

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下列生物技术的安全性和伦理问题的叙述正确的是(   

A. 种植转基因植物有可能因基因扩散而影响野生植物的基因多样性

B. 如转基因植物的外源基因来源于自然界,则不会存在安全性问题

C. 中国政府禁止生殖性克隆,但不反对治疗性克隆

D. 中国反对生物武器,但在特殊情况下可以生产生物武器

 

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下列关于动物细胞工程和胚胎工程的叙述,不正确的是(   

A.乳腺细胞比乳腺癌细胞更容易进行离体培养

B.细胞核移植主要在同种动物、同种组织的细胞之间进行

C.采用胚胎分割技术产生同卵多胚的数量是有限的

D.培养早期胚胎的培养液中含维生素、激素、血清等物质

 

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