为探究落叶是否在土壤微生物的作用下腐烂，下列各项构成了一个实验设计，其中不符合实验目的步骤是（  ）

A.可选择带有落叶的土壤为实验材料，筛出落叶和土壤

B.将落叶平均分成两份，把土壤也平均分成两份

C.将灭菌的落叶设为实验组，不做处理的落叶设为对照组

D.将落叶分别埋入两组土壤中，观察腐烂情况

欲从土壤中分离出能分解尿素的细菌，下列实验操作中不正确的是（  ）

A.将土壤用无菌水进行一系列的梯度稀释

B.同一浓度的土壤稀释液应至少涂布三个平板

C.可将未接种的培养基在相同条件下培养作为对照

D.用加入刚果红指示剂的培养基可筛选出分解尿素的细菌

（2013•惠州模拟）下列说法正确的是（  ）

A.从落叶丰富的土壤中筛选能分解纤维索的细菌

B.家庭利用酵母菌制作腐乳

C.用红色西瓜汁作还原糖鉴定的替代材料

D.观察线粒体时，利用甲甚绿染液将线粒体染成绿色，再用显微镜观察

（2014•和平区二模）某生物兴趣小组以带有落叶的表层土壤（深5cm左右）为实验材料，研究土壤微生物在适宜温度下的分解作用，对土壤处理情况见下表．与此有关的叙述不正确的是（  ）

A.探究的问题是不同土壤湿度条件下，土壤微生物对落叶的分解作用

B.该实验的自变量为土壤的是否灭菌处理，实验中的对照组是1和3

C.为了控制实验中的无关变量，作为实验材料的落叶也应进行灭菌处理

D.预期结论是1、3组的落叶不被分解，2、4组中的落叶被不同程度的分解

（2014•兰州模拟）尿素是一种重要的农业肥料，但若不经细菌的分解，就不能更好地被植物利用．生活在土壤中的微生物种类和数量繁多，同学们试图探究土壤中微生物对尿素是否有分解作用，设计了以下实验，并成功筛选到能高效降解尿素的细菌（目的菌），培养基成分如表所示，实验步骤如图所示，请分析回答问题：

KH2PO4    1.4g

Na2HPO4    2.1g

MgSO4•7H2O    0.2g

葡萄糖    10g

尿素    1g

琼脂    15g

将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到100mL

（1）此培养基能否用于植物组织培养？为什么？ 不能，缺乏植物激素 ．

（2）如图是采用纯化微生物培养的两种接种方法接种后培养的效果图．则获得图A效果的接种方法是 稀释涂布平板法 ，图B效果的接种方法是 平板划线法 ，一同学在纯化土壤中的细菌时，发现培养基上的菌落连成一片，最可能的原因是 菌液浓度过高 （答出一条即可）．

（3）“目的菌”生长所需的氮源来自培养基中的 尿素 ，其同化作用类型是 异养型 ．

（4）培养基中加入尿素的目的是筛选到 能高效降解尿素的细菌（目的菌）， ，这种培养基从功能上属于 选择 培养基．

（2007•茂名一模）【《普通高中课程标准实验教科书生物选修①》教材】

微生物与人类关系密切．虽然有些微生物能使动植物患病，但多数微生物对人类是有益的．请回答有关微生物及其应用的试题：

（1）培养微生物的培养基配方中一般含有水、碳源、氮源和无机盐．从土壤中分离分解尿素的细菌时，培养基中加的唯一氮源为 尿素 ，这种培养基称为 选择 培养基．

（2）在制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的倒平板操作时，平板冷凝后，为什么要将平板倒置？ 皿盖上会凝有水珠，防止水珠落人培养皿造成污染，还可使培养基表面的水分更好挥发

（3）微生物接种的方法很多，最常用的是平板划线法和 稀释涂布平板 法．在用平板划线法接种时，为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环？ 第一步灼烧接种环是防止接种环上有其它微生物而污染培养基，每次划线前灼烧接种环是为了杀死上次接种时留下的菌种，使下一次划线时，接种环上的菌种直接来自上次划线的末端，以便通过多次划线后，得到单个的菌落．划线结束后仍要灼烧接种环，以免菌种对环境造成污染 在划线操作结束时，仍然需要灼烧接种环吗？为什么？ 划线结束后仍要灼烧接种环，以免菌种对环境造成污染

（4）荔枝是岭南佳果，但季节性强，不耐储藏．如果把荔枝制成果酒，则能明显提高经济效益．在把荔枝制成果酒的过程中，很多因素会影响荔枝酒的产量．尤其是在制酒的第一步：把水果制成果汁时，出汁率较低，严重影响果酒产量．而果胶酶能明显增加出汁率．为了解对于﹣定量的荔枝果泥，要使用多少果胶酶最合适，生物兴趣小组同学提出了开展探究活动．请利用中学生物实验室常用器材以及下列实验材料用具，设计实验

步骤（实验课题名称、结果预测等略）．

实验材料和用具：荔枝果泥50ml、质量浓度为5%的果胶酶母液20ml、大烧杯、相同规格试管若干支、温度计、漏斗、量筒、吸管、滤纸等

设计实验步骤：

①取四支试管，编号为A、B、C、D；

②另取三支试管，编号为a、b、c．向三支试管中分别加人果胶酶母液2ml、4ml、6ml，加蒸馏水至10ml配成不同浓度的果胶酶溶液；

③向A、B、C、D四支试管各加人10mi果泥，并从a、b、c三试管中吸取2ml果胶酶液加入A、B、C三支试管，吸2ml蒸馏水加入D试管；

④将四支试管放在盛有温水的大烧杯中水浴30min；

⑤分别过滤出四支试管的果汁，并记录果汁量． ．

【生物﹣选修1生物技术实践】

某研究小组设计了以下实验探究土壤中微生物对尿素是否有分解作用，并成功筛选到能高效降解尿素的细菌（目的菌）．实验步骤如图所示，培养基成分如表所示．请分析回答问题：

KH2PO4    1.4g

Na2HPO4    2.1g

MgSO4•7H2O    0.2g

葡萄糖    10.0g

尿素    1.0g

琼脂    15.0g

将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到1000mL   

（1）培养基中加入尿素的目的是筛选 目的菌 ，这种培养基属于 选择 培养基．

（2）“目的菌”生长所需的氮源和碳源分别来自培养基中的 尿素 和 葡萄糖 ，实验需要振荡培养，原因是 为目的菌提供氧气 ．

（3）转为固体培养时，常采用 涂布平板（划线） 的方法接种，获得 单菌落 后继续筛选．

（4）下列材料或用具中：①培养细菌用的培养基与培养皿；②玻璃棒、试管、锥形瓶和吸管；③实验操作者的双手．需要灭菌的是 ①② ；需要消毒的是 ③ ．（填序号）

（5）在进行分离分解尿素的细菌的实验时，A同学从培养基上筛选出大约150个菌落，而其他同学只选择出大约50个菌落．A同学的实验结果产生的原因可能有 ①②③ （填序号）．

①由于土样不同  ②由于培养基污染     ③由于操作失误  ④没有设置对照

（6）在该实验中，可以通过检测培养基pH的变化来判断尿素是否被分解，所依据的原理是 微生物产生的脲酶能将尿素分解成氨，氨会使培养基的pH升高 ．所用方法是在培养基中加入 酚红指示剂 ，若尿素被分解，则培养基变成红色．

土壤是“微生物的天然培养基”，下面是有关土壤中分解尿素的细菌分离和计数的实验过程，请根据图回答相关问题：

（1）能分解尿素的细菌代谢类型为 异氧需氧型 ，应从富含有机质的土壤表层取土样．

（2）为分离出土壤中分解尿素的细菌，应该用 尿素为唯一氮源 的培养基进行分离，并加入 酚红 指示剂进行鉴别．

（3）若取土样5g，应加入 45 ml的无菌水配制成稀释10倍土壤溶液．因土壤中细菌密度很大，需要不断加以稀释，配制成如图所示的不同浓度的土壤溶液．取样稀释前，一定要 摇均 以减少误差．将103﹣107倍的稀释液分别吸取0.1mL加入到固体培养基上，用 涂布器（玻璃刮刀） 将菌液铺平．这种接种方法称为 稀释涂布（平板）法 ．

（4）将接种的培养皿放置在37℃恒温培养箱中培养24h～48h，观察并统计具有 红色环带 （现象）的菌落数，结果如下表，其中 105或106 倍的稀释比较合适．

稀释倍数    103    104    105    106    107

菌落数（个）    500    367    248    36    18

尿素是一种高浓度氮肥且长期施用没有不良影响，但尿素只有通过土壤中某些细菌的分解作用，才能被植物吸收利用．某同学要分离出土壤中能分解尿素的细菌，并尝试进行计数，培养基配方如下：

K2HPO4    NaCl    H2O    葡萄糖    尿素    酚红    琼脂

0.12g    0.12g    15mL    0.025g    2.0g    0.25mg    0.5g

（1）分解尿素的细菌都能合成 脲酶 ，该种细菌在生态平衡中起到什么作用？ 参与了氮循环（或维持氮平衡） ．写出细菌分解尿素的方程式 ．

（2）根据培养基的成分判断，该同学能否分离出土壤中分解尿素的细菌？ 不能 （能/不能），原因是 琼脂是未被纯化的混合物，内含一定的含氮化合物，尿素不是唯一氮源，不能选择出只以尿素为氮源的微生物 ．

（3）分离得到分解尿素的细菌后，如果要扩大培养，则应选择 培养基进行培养．培养一段时间后，使用 对微生物细胞进行计数．计数过程中，下列哪种行为会影响计数的准确性 A

A．计数时直接从静置培养的试管底部取培养液进行计数

B．如果方格内微生物细胞数量多于300 个，培养液先稀释后再计数

C．如果微生物细胞有粘连，要数出团块中的每一个细胞

D．压在方格线上的细胞只计左线和上线上的细胞数

（4）为了提高尿素肥效，可以将分解尿素的酶和尿素混合，制成“加酶尿素”．为了提高“加酶尿素”中酶的利用率，可采用 固定化酶 技术．

有关生物技术的操作过程或应用的叙述，错误的是（  ）

A.测定泡菜中亚硝酸盐含量时需要标准显色液

B.可用聚乙二醇促进植物细胞原生质体的融合

C.胚胎分割技术可看做是动物无性繁殖的方法

D.以尿素作为唯一碳源的培养基用于鉴别细菌