关于现代生物技术应用的叙述,错误的是(  )

A.蛋白质工程可合成自然界中不存在的蛋白质

B.体细胞杂交技术可用于克隆动物和制备单克隆抗体

C.植物组织培养技术可用于植物茎尖脱毒

D.动物细胞培养技术可用于转基因动物的培育

某兴趣小组拟用组织培养繁殖一种名贵花卉,其技术路线为“取材→消毒→愈伤组织培养→出芽→生根→移栽”。下列有关叙述,错误的是(  )

A.消毒的原则是既杀死材料表面的微生物,又减少消毒剂对细胞的伤害

B.在愈伤组织培养中加入细胞融合的诱导剂,可获得染色体加倍的细胞

C.出芽是细胞再分化的结果,受基因选择性表达的调控

D.生根时,培养基通常应含α萘乙酸等生长素类调节剂

如图是从酵母菌获取某植物需要的某种酶基因的流程,结合所学知识及相关信息回答下列问题:

(1)图中cDNA文库    (填“大于”“等于”或“小于”)基因组文库。

(2)①过程提取的DNA需要      的切割,B过程是    。

(3)为在短时间内大量获得目的基因,可用    扩增的方法,其原理是        。

(4)目的基因获取之后,需要进行        ,其组成必须有          以及标记基因等,此步骤是基因工程的核心。

(5)将该目的基因导入某双子叶植物细胞,常采用的方法是    ,其能否在此植物体内稳定遗传的关键是        ,可以用       技术进行检测。

(6)如果要想使该酶活性更强或具有更强的耐受性,需要对现有蛋白质进行改造,这要通过基因工程的延伸——蛋白质工程。首先要设计预期的    ,再推测应有的氨基酸序列,找到相对应的        。

(7)除植物基因工程硕果累累之外。在动物基因工程、基因工程药物和基因治疗等方面也取得了显著成果,请列举出至少两方面的应用:                                                              。

下列甲、乙两图为获得生物新品种的过程示意图。请据图回答。

(1)检测目的基因是否转录出mRNA的具体方法是使用     与提取出的    做分子杂交。

(2)在培育转基因植物的研究中,卡那霉素抗性基因(kanr)常作为标记基因,只有含卡那霉素抗性基因的细胞才能在卡那霉素培养基上生长。乙图为获得抗虫棉技术的流程。A过程需要的酶有           。图中将目的基因导入植物受体细胞采用的方法是    。C过程的培养基除含有必要营养物质、琼脂和激素外,还必须加入      。

(3)随着科技发展,获取目的基因的方法也越来越多,若乙图中的“抗虫基因”是利用甲图中的方法获取的,该方法称为        。图中①过程与细胞中DNA复制过程相比,该过程不需要    酶。③是在    (填“酶的名称”)作用下进行延伸的。

(4)离体棉花叶片组织经C、D、E成功地培育出了转基因抗虫植株,此过程涉及的细胞工程技术是       ,该技术的原理是        。

如图表示利用农杆菌转化法获得某种转基因植物的部分操作步骤。以下说法错误的是(  )

A.利用含有四环素的培养基可将含分子Ⅱ的细菌筛选出来

B.Ⅲ是农杆菌,通过步骤③将目的基因导入植株

C.⑥可与多个核糖体结合,并可以同时翻译出多种蛋白质

D.①过程的完成需要限制酶和DNA连接酶的参与

降钙素是一种多肽类激素,临床上用于治疗骨质疏松症等。人的降钙素活性很低,半衰期较短。某科研机构为了研发一种活性高、半衰期长的新型降钙素,从预期新型降钙素的功能出发,推测相应的脱氧核苷酸序列,并人工合成了两条72个碱基的DNA单链,两条链通过18个碱基对形成部分双链DNA片段,再利用Klenow酶补平,获得双链DNA,过程如下图:

获得的双链DNA经EcoRⅠ(识别序列和切割位点—G↓AATTC—)和BamHⅠ(识别序列和切割位点—G↓GATCC—)双酶切后插入到大肠杆菌质粒中。下列有关分析不正确的是(  )

A.Klenow酶是一种DNA聚合酶

B.合成的双链DNA有72个碱基对

C.EcoRⅠ和BamHⅠ双酶切的目的是保证目的基因和运载体的定向连接

D.筛选重组质粒需要大肠杆菌质粒中含有标记基因

金茶花是中国特有的观赏品种,但易得枯萎病。科学家在某种植物中找到了抗枯萎病的基因,通过下图所示的方法培育出了抗枯萎病的金茶花新品种。相关叙述正确的是(  )

A.图中①②在基因工程中依次叫做基因表达载体、目的基因

B.形成③的操作中使用的酶有限制酶、DNA聚合酶和DNA连接酶

C.由④培育至⑤过程中,依次经历了脱分化、再分化过程

D.在⑤幼苗中检测到抗枯萎病基因标志着成功培育新品种

生物分子间特异性结合的性质广泛用于生命科学研究。以下实例为体外处理“蛋白质-DNA复合体”获得DNA片段信息的过程图。

据图回答:

(1)过程①酶作用的部位是          键。此过程只发生在非结合区DNA,过程②酶作用的部位是        键。

(2)①、②两过程利用了酶的        特性。

(3)若将得到的DNA片段用于构建重组质粒,需要将过程③的测序结果与         酶的识别序列进行比对,以确定选用何种酶。

(4)如果复合体中的蛋白质为RNA聚合酶,则其识别、结合的DNA序列区为基因的        。

(5)以下研究利用了生物分子间特异性结合性质的有    (多选)。

A.分离得到核糖体,用蛋白酶酶解后提取rRNA

B.用无水乙醇处理菠菜叶片,提取叶绿体基粒膜上的光合色素

C.通过分子杂交手段,用荧光物质标记的目的基因进行染色体基因定位

D.将抑制成熟基因导入番茄,其mRNA与催化成熟酶基因的mRNA互补结合,终止后者翻译,延迟果实成熟

肺细胞中的let7基因表达减弱,癌基因RAS表达增强,会引发肺癌。研究人员利用基因工程技术将let7基因导入肺癌细胞实现表达,发现肺癌细胞的增殖受到抑制。该基因工程技术基本流程如图1。

请回答:

(1)进行过程①时,需用        酶切开载体以插入let7基因。载体应有RNA聚合酶识别和结合的部位,以驱动let7基因转录,该部位称为                           。

(2)进行过程②时,需用    酶处理贴附在培养皿壁上的细胞,以利于传代培养。

(3)研究发现,let7基因能影响癌基因RAS的表达,其影响机理如图2。据图分析,可从细胞中提取    进行分子杂交,以直接检测let7基因是否转录。肺癌细胞增殖受到抑制,可能是由于细胞中    (RAS mRNA/RAS蛋白)含量减少引起的。

斑马鱼的酶D由17号染色体上的D基因编码。具有纯合突变基因(dd)的斑马鱼胚胎会发出红色荧光。利用转基因技术将绿色荧光蛋白(G)基因整合到斑马鱼17号染色体上,带有G基因的胚胎能够发出绿色荧光。未整合G基因的染色体的对应位点表示为g。用个体M和N进行如下杂交实验。

(1)在上述转基因实验中,将G基因与质粒重组,需要的两类酶是         和    。将重组质粒显微注射到斑马鱼    中,整合到染色体上的G基因    后,使胚胎发出绿色荧光。

(2)根据上述杂交实验推测:

①亲代M的基因型是    (选填选项前的符号)。

a.DDggb.Ddgg

②子代中只发出绿色荧光的胚胎基因型包括    (选填选项前的符号)。

a.DDGGb.DDGgc.DdGGd.DdGg

(3)杂交后,出现红·绿荧光(既有红色又有绿色荧光)胚胎的原因是亲代    (填“M”或“N”)的初级精(卵)母细胞在减数分裂过程中,同源染色体的         发生了交换,导致染色体上的基因重组。通过记录子代中红·绿荧光胚胎数量与胚胎总数,可计算得到该亲本产生的重组配子占其全部配子的比例,算式为                                                                          。