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图1表示含有目的基因D的DNA片段长度(bp即碱基对)和部分碱基序列,图2表示一种质粒的结构和部分碱基序列。现有MspⅠ、BamHⅠ、MboⅠ、SmaⅠ 4种限制性核酸内切酶,它们识别的碱基序列和酶切位点分别为CCGG、GGATCC、GATC、CCCGGG。请回答下列问题:

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(1)图1的一条脱氧核苷酸链中相邻两个碱基之间依次由        连接。

(2)若用限制酶SmaⅠ完全切割图1中DNA片段,产生的末端是    末端,其产物长度为        

(3)若图1中虚线方框内的碱基对被T满分5 manfen5.comA碱基对替换,那么基因D就突变为基因d。从杂合子中分离出图1及其对应的DNA片段,用限制酶SmaⅠ完全切割,产物中共有    种不同长度的DNA片段。

(4)若将图2中质粒和目的基因D通过同种限制酶处理后进行连接,形成重组质粒,那么应选用的限制酶是    。在导入重组质粒后,为了筛选出含重组质粒的大肠杆菌,一般需要用添加的培养基进行培养。经检测,部分含有重组质粒的大肠杆菌菌株中目的基因D不能正确表达,其最可能的原因是                                                                                      

 

根据基因工程的有关知识,回答下列问题:

(1)限制性内切酶切割DNA分子后产生的片段,其末端类型有       

(2)质粒运载体用EcoRⅠ切割后产生的片段如下:

AATTC……G

G……CTTAA

为使运载体与目的基因相连,含有目的基因的DNA除可用EcoRⅠ切割外,还可用另一种限制性内切酶切割,该酶必须具有的特点是                                                                 

(3)按其来源不同,基因工程中所使用的DNA连接酶有两类,即    DNA连接酶和    DNA连接酶。

(4)反转录作用的模板是    ,产物是    。若要在体外获得大量反转录产物,常采用    技术。

(5)基因工程中除质粒外,        也可作为运载体。

(6)若用重组质粒转化大肠杆菌,一般情况下,不能直接用未处理的大肠杆菌作为受体细胞,原因是                                                                                           

 

普通酵母菌直接利用淀粉的能力很弱,有人将地衣芽孢杆菌的α满分5 manfen5.com淀粉酶基因转入酵母菌中,经筛选得到了可高效利用淀粉的工程酵母菌菌种(过程如图甲所示)。

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(1)图甲中,过程①需要的酶有            。为达到筛选目的,平板内的固体培养基应以

      作为唯一碳源。②、③过程需重复几次,目的是                             

(2)某同学尝试过程③的操作,其中一个平板经培养后的菌落分布如图乙所示。该同学的接种方法是              ;推测该同学接种时可能的操作失误是          

(3)以淀粉为原料,用工程酵母菌和普通酵母菌在相同的适宜条件下密闭发酵,接种    菌的发酵罐需要先排气,其原因是                                                                     

(4)用凝胶色谱法分离α满分5 manfen5.com淀粉酶时,在色谱柱中移动速度较慢的蛋白质,相对分子质量较     

 

阅读如下资料:

资料甲:科学家将牛生长激素基因导入小鼠受精卵中,得到了体型巨大的“超级小鼠”;科学家采用农杆菌转化法培育出转基因烟草。

回答下列问题:

资料甲属于基因工程的范畴。将基因表达载体导入小鼠的受精卵中常用    法。构建基因表达载体常用的工具酶是                    。在培育有些转基因植物时,常用农杆菌转化法,农杆菌的作用是

 

将ada(腺苷酸脱氨酶基因)通过质粒pET28b导入大肠杆菌并成功表达腺苷酸脱氨酶。下列叙述错误的是(  )

A.每个大肠杆菌细胞至少含一个重组质粒

B.每个重组质粒至少含一个限制性核酸内切酶识别位点

C.每个限制性核酸内切酶识别位点至少插入一个ada

D.每个插入的ada至少表达一个腺苷酸脱氨酶分子

 

天然的玫瑰没有蓝色花,这是由于缺少控制蓝色色素合成的基因B,而开蓝色花的矮牵牛中存在序列已知的基因B。现用基因工程技术培育蓝玫瑰,下列操作正确的是(  )

A.提取矮牵牛蓝色花的mRNA,经逆转录获得互补的DNA,再扩增基因B

B.利用限制性核酸内切酶从开蓝色花矮牵牛的基因文库中获取基因B

C.利用DNA聚合酶将基因B与质粒连接后导入玫瑰细胞

D.将基因B直接导入大肠杆菌,然后感染并转入玫瑰细胞

 

如图为通过DNA分子杂交鉴定含有某特定DNA的细菌克隆示意图。下列叙述正确的是(  )

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A.根据培养皿中菌落数可以准确计算样品中含有的活菌实际数目

B.外源DNA必须位于重组质粒的启动子和终止子之间才能进行复制

C.重组质粒与探针能进行分子杂交是因为DNA分子脱氧核糖和磷酸交替连接

D.放射自显影结果可以显示原培养皿中含有特定DNA的细菌菌落位置

 

现有无标签的稀蛋清、葡萄糖、淀粉和淀粉酶溶液各一瓶,可用双缩脲试剂、斐林试剂和淀粉溶液将它们鉴定出来。

(1)用一种试剂将上述4种溶液区分为两组,这种试剂是       ,其中发生显色反应的一组是           两种溶液,不发生显色反应的一组可以用    试剂来区分两种溶液。 

(2)区分发生显色反应的一组溶液:①将发生显色反应的两种溶液分别取2 mL加入2支试管,然后分别加入         ; 

②用斐林试剂分别处理上述两种混合溶液,65 ℃水浴观察现象。

③分析结果:观察到        现象的是        溶液;观察到        现象的是        溶液。 

 

红薯和土豆都富含淀粉(不溶于水),但红薯吃起来比土豆甜。为探究其原因,某兴趣小组在温度不同、其他条件相同的情况下对处于休眠期的红薯块根与土豆块茎处理30 min,取等量红薯块和土豆块,分别加等量的蒸馏水制成提取液,加入斐林试剂后加热至60 ℃颜色变化如图所示。相关叙述不正确的是(  )

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A.淀粉不是还原性糖,是无甜味的糖

B.休眠的红薯块茎中含有淀粉酶,休眠的土豆块茎中不含淀粉酶

C.加入斐林试剂时应先加入斐林试剂甲液,再加入斐林试剂乙液

D.由图中曲线可知,60 ℃时红薯中淀粉酶活性最高

 

在生物组织中还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定实验中,对实验材料的选择,下列叙述错误的是(  )

A.可用斐林试剂甲液和乙液、蒸馏水来鉴定葡萄糖和尿液中的蛋白质

B.花生种子含脂肪多且子叶肥厚,是用于脂肪鉴定的理想材料

C.食用花生油最好选用苏丹Ⅳ染液来鉴定,而一般不选用苏丹Ⅲ染液来鉴定

D.甘蔗茎的薄壁组织、甜菜的块根等,都含有较多糖且近于白色,因此可以用于进行还原糖的鉴定

 

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