随着煤炭、石油、天然气等传统能源的过度开发利用以及引起的环境污染，科学家们开始致力于寻找可替代的清洁新型能源。芒草为C4植物，具有光合效率高、二氧化碳排放量低以及纤维素含量丰富等特点，从而被选为最具潜力的生物质能源作物。下图为利用芒草成熟种子为外植体进行植物组织培养的流程图。

（1）为了防止微生物污染，过程①所用的种子需要无菌处理，方法有_________

A．75%酒精处理   B．5%的次氯酸钠处理   C．无菌水冲洗   D．高温煮沸消毒

（2）过程②、过程③分别称为_________、_________，由图分析可知诱导芒草形成愈伤组织最佳的激素配比浓度为_________。该过程在MA+3%蔗糖+0．7%琼脂为基本培养基、25度左右的_________条件下无菌培养，基本培养基加入蔗糖的目的是_________。

（3）多倍体植物茎秆粗壮、叶片比较大，在原流程的基础上增加_________这一步操作就可以获得多倍体芒草。

人类在预防与诊疗传染性疾病过程中，经常使用疫苗和抗体。下图为A型流感病毒PB1蛋白单克隆抗体的制备部分过程，请回答：

（1）若要在体外获得大量的PB1基因，常采用_________技术进行扩增。

（2）限制酶BamH I的识别序列和切点是－G↓GATCC－，在构建PB1基因表达载体过程中，所用的载体质粒上有该酶的一个切点。一个质粒分子经Bam H I切割前后，分别含有_______、_________个游离的磷酸基团。质粒被限制酶Bam H I切割后所形成的黏性末端是_______。

（3）过程④所用的促融方法是_________，获得的X是_________。

（4）单克隆抗体与常规的血清抗体相比，最大的优越性是_________。

（5）对该传染病疑似患者确诊时，可以用图中的_________进行特异性结合检测。

2018年1月，两只克隆小猴“中中”和“华华”登上国际期刊《细胞》，成了举世瞩目的大明星。这是世界首例非人灵长类动物的体细胞克隆。它们的诞生意味着以体细胞克隆猴为实验动物模型的时代就此开启。下图是该项技术的流程图，请据图回答问题：

（1）图中选择A猴胚胎期而非成年期的成纤维细胞进行培养，其原因是________________。放入培养瓶中的细胞沉降底部后首先会出现______________现象。每一次进行传代培养，应用_________酶处理获得细胞悬液。

（2）对B猴使用_________处理，使其超数排卵，收集并选取处于_________时期的卵母细胞用于核移植。

（3）为获得更多的“中中”“华华”，可在胚胎移植前对胚胎进行_________。

（4）“中中”“华华”的诞生意味着以体细胞克隆猴为实验动物模型的时代就此开启，优势之一是同一批克隆猴的遗传背景相同，“中中”“华华”的遗传物质来自于_________。

基因工程中可以通过PCR技术扩增目的基因。回答下列问题：

（1）基因工程中所用的目的基因可以从基因文库中获得，也可以在高效表达目的基因的生物组织中提取mRNA，通过_________获得目的基因。

（2）目的基因扩增需要引物，所用的引物组成为如图中_________。

（3）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是_________。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是_________。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的_________。

（4）PCR扩增时，退火温度的设定是成败的关键。退火温度过高会破坏模板与引物的碱基配对。退火温度的设定与引物长度、碱基组成有关，长度相同但_________的引物需要设定更高的退火温度。

（5）目前在PCR反应中使用Taq酶而不使用大肠杆菌DNA聚合酶的主要原因是__________。

图1是某基因工程中构建重组质粒的过程示意图，载体质粒P0具有氨苄青霉素抗性基因（amp'）和四环素抗性基因（tet'）。请回答下列问题：

（1）EcoRV酶切位点为…CTA↑TAG…，EcoR V酶切出来的线性载体P1为_________未端。

（2）用Taq DNA聚合酶进行PCR扩增获得的目的基因片段，其两端分别带有一个腺嘌呤脱氧核苷酸和鸟嘌呤脱氧核苷酸，两端添加不同的核苷酸的主要目的是____________________。载体P1用酶处理，在两端分别添加了碱基为_________的脱氧核苷酸，形成P2；P2和目的基因片段在_________酶作用下，形成重组质粒P3。

（3）为筛选出含有重组质粒P3的菌落，采用含有不同抗生素的平板进行筛选，得到A、B、C三类菌落，其生长情况如下表（“+”代表生长，“－”代表不生长）。根据表中结果判断，应选择的菌落是_________（填表中字母）类，另外两类菌落质粒导入情况分别是_________、_________。

（4）为检测目的基因是否正常表达，可采用_________方法进行鉴定。

下列有关发酵技术在食品加工中应用的叙述，不正确的是（    ）

A.为了避免杂菌污染，乳酸菌发酵酸奶时在牛奶中添加一定量的抗生素

B.为了提高果酒品质，挑选新鲜葡萄去除枝梗后用蒸馏水反复冲洗再榨汁

C.为了防止果酒变酸，果酒发酵排气时应避免空气进入及发酵引起的温度过高

D.为了降低亚硝酸盐含量，减少泡菜腌制时间和用盐量

下列生物技术的安全性和伦理问题的叙述正确的是（    ）

A. 种植转基因植物有可能因基因扩散而影响野生植物的基因多样性

B. 如转基因植物的外源基因来源于自然界，则不会存在安全性问题

C. 中国政府禁止生殖性克隆，但不反对治疗性克隆

D. 中国反对生物武器，但在特殊情况下可以生产生物武器

下列关于动物细胞工程和胚胎工程的叙述，不正确的是（    ）

A.乳腺细胞比乳腺癌细胞更容易进行离体培养

B.细胞核移植主要在同种动物、同种组织的细胞之间进行

C.采用胚胎分割技术产生同卵多胚的数量是有限的

D.培养早期胚胎的培养液中含维生素、激素、血清等物质

培养胡萝卜根组织可获得试管苗，获得试管苗的过程如图所示，下列说法正确的是（    ）

A.步骤③切取的组织块中要带有形成层，原因是形成层容易诱导形成愈伤组织

B.步骤⑤和步骤⑥培养基中细胞分裂素和生长素的含量、比例不同

C.步骤⑥要需要进行避光培养

D.利用胡萝卜根段进行组织培养可以形成试管苗，这是因为植物细胞具有全能性

某科研小组利用质粒（图1）和目的基因（图2）构建重组DNA，下列分析正确的是（ ）

A.用限制酶HindII和BamHI切割质粒，可得到2条DNA片段

B.不能用BamHI酶切割质粒和外源DNA的原因是BamHI酶会破坏目的基因和抗性基因

C.构建重组DNA时，需选择限制酶Bcl I和HindIII同时切割质粒和外源DNA

D.导入了重组DNA的细菌能在含四环素的培养基上生长而不能在含氨苄青霉素的培养基上生长