随着环境污染的加剧和石油危机的出现,越来越多的国家使用乙醇作为燃料,玉米和麦草的秸秆可以用来生产燃料乙醇,已知秸秆的主要成分是纤维素,回答下列问题:

(1)人们首先利用纤维素分解菌将纤维素分解,纤维素分解菌多分布在    的土壤中,该微生物产生的纤维素酶是一种复合酶,一般包括三种成分:    ,    和    。前两种酶能使纤维素分解成纤维二糖,第三种酶将纤维二糖分解成葡萄糖。

(2)从土壤中筛选纤维素分解菌需要配制    培养基,该培养基中需要加入纤维素粉作为唯一的    。

(3)经过梯度稀释后,要将样品均匀涂布在用于鉴别纤维素分解菌的培养基上,在该培养基中需要加入的特殊染料是    ,当形成菌落以后可以根据菌落周围是否产生    来筛选纤维素分解菌。当利用涂布器涂布平板之后需要对涂布器进行    处理(填“消毒”或“灭菌”)。

(4)产生葡萄糖后需要用到    (微生物种类)发酵产生酒精,还可以使用    检测产物是否为酒精,该试剂在酸性条件下可与酒精反应,溶液呈灰绿色。

下图表示为平板划线法分离纯化细菌示意图。根据所学生物学知识,完成下列问题。

(1)微生物所需的营养成分包括        、        、水和无机盐。

(2)培养微生物时,除考虑微生物生长所需的营养外,还要考虑微生物生长所需的温度、    以及是否需要O2等。

(3)对培养基进行灭菌时,多采用    法,而对接种环或涂布器灭菌时则用    法。

(4)平板划线时,为保证每次划线都从上次划线末端的微生物浓度开始,所以每次划线前都要    ,平板划线结束后,最后一次划的线不能与第一次划的线    。

(5)脲酶可以将尿素分解为氨,从而使尿素溶液pH升高,这可用    试剂来检验。用纤维素做唯一碳源的培养基培养微生物,得到的纤维素分解菌中可能还混杂有    。

(6)抗生素可以抑制肽聚糖合成,从而可以抑制多数原核生物繁殖。实验室现有酵母菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌三种微生物混杂生长的固体培养基,已知大肠杆菌菌落遇伊红—美蓝试剂变为紫色,并带有金属光泽;金黄色葡萄球菌耐高浓度食盐水,菌落为金黄色;酵母菌细胞壁成分主要为几丁质,营养条件好,氧气充足,显微镜下可见典型的出芽生殖。现在请你设计一个合理的实验方案,从一个培养基中,将三种微生物一次分离开来。(所需试剂可自选)

实验方案:                                                                     

       。

分离纤维素分解菌的实验过程中,操作有误的是(  )

A.经选择培养后将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上

B.富集培养这一步可省略,但所培养的纤维素分解菌少

C.经稀释培养后,用刚果红染色

D.对照组可用同样量的培养液涂布到不含纤维素的培养基上

请选出土壤微生物分离的正确操作步骤(  )

①土壤取样

②称取0.5 g土壤将其加入盛有50 mL无菌水的锥形瓶中

③吸取1 mL进行平板涂抹

④依次稀释至103、104、105、106、107

A.①→②→③→④B.①→③→②→④

C.①→②→④→③D.①→④→②→③

下列能选择出分解尿素的细菌的培养基是(  )

A.KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、葡萄糖、尿素、琼脂、水

B.KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、葡萄糖、琼脂、水

C.KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、尿素、琼脂、水

D.KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、牛肉膏、蛋白胨、琼脂、水

氯苯化合物是重要的有机化工原料,因其不易降解,会污染环境。某研究小组依照下列实验方案(图1)筛选出能高效降解氯苯的微生物SP1菌,培养基配方如表1。

表1 培养基的组成

(1)配制Ⅱ号固体培养基时,除添加Ⅱ号液体培养基成分外,还应添加1%的    。

(2)培养基配制时,灭菌与调pH的先后顺序是    。

(3)从用途上来说,Ⅰ号培养基和Ⅱ号培养基分别属于    培养基和    培养基。在Ⅱ号培养基中,为SP1菌提供氮源的成分是     。 

(4)在营养缺乏或环境恶劣时,SP1的菌体会变成一个圆形的休眠体,这种休眠体被称为    。

(5)将SP1菌接种在含不同浓度氯苯的Ⅲ号培养液中培养,得到生长曲线(如图2)。从图2可知SP1菌在          培养条件下最早停止生长,其原因是                。

(1)在大肠杆菌培养过程中,除考虑营养条件外,还要考虑    、    和渗透压等条件。由于该细菌具有体积小、结构简单、变异类型容易选择、    、    等优点,因此常作为遗传学研究的实验材料。

(2)在微生物培养操作过程中,为防止杂菌污染,需对培养基和培养皿进行    (填“消毒”或“灭菌”);操作者的双手需进行清洗和    ;静止空气中的细菌可用紫外线杀灭,其原因是紫外线能使蛋白质变性,还能    。

(3)若用稀释涂布平板法计数大肠杆菌活菌的个数,要想使所得估计值更接近实际值,除应严格操作、多次重复外,还应保证待测样品稀释的    。

(4)通常,对获得的纯菌种还可以依据菌落的形状、大小等菌落特征对细菌进行初步的    。

(5)培养大肠杆菌时,在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采用的检测方法是     

                                                                                       。

(6)若用大肠杆菌进行实验,使用过的培养基及培养物必须经过    处理后才能丢弃,以防止培养物的扩散。 

点睛:本题综合考查微生物的培养条件、培养基种类和计数等知识,考查学生的识记能力和综合应用能力。

某学者欲研究被石油污染过的土壤中细菌数量,并从中筛选出能分解石油的细菌。下列操作错误的是(  )

A.利用平板划线法对细菌进行计数

B.用以石油为唯一碳源的培养基筛选

C.采用稀释涂布平板法分离菌种

D.称取和稀释土壤时应在火焰旁

某同学在101、102、103倍稀释液的平均菌落数为2 760、295和46,则菌落总数

(个/mL)为(  )

A.2.76×104B.2.95×104

C.4.6×104D.3.775×104

能够测定样品活菌数的方法是(  )

A.稀释涂布平板法B.直接计数法

C.重量法            D.比浊法