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下列是关于“检测土壤中细菌总数”实验操作的叙述,其中错误的是(  )

A.用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基,经高温、高压灭菌后倒平板

B.取104、105、106倍的土壤稀释液和无菌水各0.1 mL,分别涂布于各组平板上

C.将实验组和对照组平板倒置,37 ℃恒温培养24~48小时

D.确定对照组无菌后,选择菌落数在300以上的实验组平板进行计数

 

某中学杨老师自制大蒜提取液,希望这种简便、经济的提取液能够高效地杀灭餐具上的细菌,杨老师完成了下面的探究实验:

(1)制作提取液:杨老师将大蒜榨汁后制成提取液,具体做法如下表所示。请根据表中数据,在表中的括号内填出1#提取液应加入的冷开水量:

大蒜提取液编号

1#

2#

大蒜(g)

350

350

冷开水(mL)

(  )

880

无色食醋(mL)

/

20

制备量

1 000 mL

1 000 mL

(2)使用方法:将餐具浸泡在提取液中10 min后取出冲洗。

(3)样品抽取:将经过    处理的滤纸贴在餐具表面1 min,然后将滤纸放到50 mL无菌水中,充分振荡后制成原液。再取1 mL原液加入    mL无菌水中摇匀制成10倍稀释液。

(4)分离及培养:用    法分离细菌。分别取1 mL原液和10倍稀释液,分别加到伊红-美蓝培养基中,用灭菌、消毒后的    (用具),将原液和10倍稀释液均匀涂布到整个平板上。每个浓度各做三个培养皿,其目的是   

本实验另设1 mL无菌水涂布在未接种的培养皿上为空白对照,原因是排除                       

最后在37 ℃下培养48 h。

(5)观察记录:设计1#提取液实验组的观察记录表。

(6)结果分析:统计数据,得到消毒前后的菌落总数变化(单位:cfu/cm2,每平方厘米样品中含有的细菌群落总数)

编号

条件

总份数

<1

1~10

10~102

102~103

103~104

>104

1#

取液

消毒前

30

0

0

0

3

18

9

消毒后

30

14

12

4

0

0

0

2#

取液

消毒前

33

2

0

0

3

12

16

消毒后

33

19

10

4

0

0

0

根据消毒前后的数据可知:                                                                 

2#提取液效果高于1#,分析可能的原因:                                                      

请你给老师提出需要进一步研究的问题:                                                   

 

常见的酿酒酵母菌只能利用葡萄糖而不能利用木糖,自然界中一些酵母菌能分解木糖产生酒精但对酒精的耐受能力较差。下面是利用木糖发酵产生酒精的酿酒酵母菌的培育过程,请分析回答下列问题:

(1)将自然界中采集到的葡萄带回实验室,用    将葡萄皮上的微生物冲洗到无菌的三角瓶中,瓶中的液体经适当稀释后,用      法接种于固体培养基上,在适宜的条件下培养,获得各种菌落。

(2)将培养基上的酵母菌菌株转接到以木糖为唯一碳源的培养基中,无氧条件下培养一周后,有些酵母菌死亡,说明这些酵母菌             。从存活的酵母菌提取DNA,并用PCR技术大量扩增目的基因。

(3)将目的基因连接到一种穿梭质粒(可以在大肠杆菌中复制和在酿酒酵母菌中表达的质粒)上。该质粒具有两种标记基因,即氨苄青霉素抗性基因和尿嘧啶合成酶基因。大肠杆菌被该质粒转化后,应接种于含    的培养基上进行筛选。将质粒导入酵母菌时,由于氨苄青霉素不能抑制酵母菌繁殖,应选择缺乏    能力的酿酒酵母菌作为受体菌。从细胞结构看,酵母菌不同于大肠杆菌的主要特点是                 

(4)对转基因酿酒酵母菌发酵能力进行测试,结果如下图所示。

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据图分析,将转基因酿酒酵母菌接种在    为碳源的培养基中进行发酵能力测试,最初培养基中的    糖被快速消耗,随着发酵继续进行,转基因酿酒酵母菌能够                  ,说明所需菌株培育成功。

 

二口恶英是持久性有机污染物,其毒性强,降解难。某种白腐真菌能利用二口恶英中的碳元素作为碳源。为了降解废水中的二口恶英,研究人员从土壤中筛选获得了能降解利用二口恶英的白腐真菌菌株,筛选的主要步骤如图所示,①为土壤样品,⑧为筛选出的目的菌株。请回答下列问题:

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(1)⑤中培养目的菌株的选择培养基中应加入    作为唯一碳源,如果要测定②中活菌数量,常采用    法。

(2)④、⑥为对照组,⑤为实验组,④、⑥中加入马铃薯琼脂培养基(培养真菌的培养基)。若⑥在培养过程中没有菌落生长,说明培养基没有    ;若④中的菌落数目明显    (填“多于”或“少于”)⑤,说明⑤已经筛选出一些菌落。

(3)在提取白腐真菌细胞内的分解酶时,通常先将菌株细胞        制取粗酶液,再进一步获得相应的酶;从中分离提取的酶通常需要检测    ,以确定其应用价值;为降低生产成本,可利用    技术使白腐真菌重复利用。

(4)提取白腐真菌细胞内的蛋白质过程中,为了保证蛋白质不变性,需要对样品进行洗脱,措施一般是需要加入    ;在装填凝胶柱时,如果有    存在,会搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序,降低分离效果。该真菌可以产生某种挥发性强、易溶于有机溶剂的芳香化合物,适于采用法提取。

 

不同的微生物对营养物质的需要各不相同。下列有关一种以CO2为唯一碳源的自养微生物营养的描述不正确的是(  )

A.氮源物质为该微生物提供必要的氮素

B.碳源物质也是该微生物的能源物质

C.无机盐是该微生物不可缺少的营养物质

D.水是该微生物的营养要素之一

 

下列有关微生物的培养或纯化的叙述,错误的是(  )

A.微生物在培养前要先对培养基进行灭菌处理再接种

B.培养液中溶氧量的变化会影响酵母菌的繁殖和代谢途径

C.分离自养型微生物的方法是用纤维素作为唯一碳源的培养基

D.分离纯化微生物的常用方法是平板划线法和稀释涂布平板法

 

有人通过实验探究某海藻的最佳培养条件,以获得最大生物量(注:生物量指单位体积的藻体干重)。

(1)在有光条件下培养海藻时,培养液中必须含有        ,还需定时向培养液中通入空气,目的是提供    。海藻光合速率随着不同光照强度的变化曲线如下图,图中B点表示最佳的培养条件。

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(2)该海藻在无光条件下仍能生长,但需在培养液中添加葡萄糖等有机物,目的是提供   

(3)向培养液中添加葡萄糖配成不同浓度的培养液,在一定光照条件下培养该海藻,测定海藻的生物量如下表:

葡萄糖

浓度(g/L)

0

0.1

0.2

0.4

0.6

1.0

海藻生

物量(g/L)

0.84

0.93

1.00

1.03

0.79

0.67

要确定培养海藻的最佳葡萄糖浓度,还需设计           的实验。

(4)综合上述实验,获得该海藻最大生物量的培养条件是                                    

 

有些细菌可分解原油,从而消除由原油泄漏造成的土壤污染。某同学欲从受原油污染的土壤中筛选出能高效降解原油的菌株。回答问题:

(1)在筛选过程中,应将土壤样品稀释液接种于以        为唯一碳源的固体培养基上,从功能上讲,该培养基属于    培养基。

(2)纯化菌种时,为了得到单菌落,常采用的接种方法有两种,即         

(3)为了筛选出高效菌株,可比较单菌落周围分解圈的大小,分解圈大说明该菌株的降解能力   

(4)通常情况下,在微生物培养过程中,实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、        。无菌技术要求实验操作应在酒精灯    附近进行,以避免周围环境中微生物的污染。

 

回答下列关于微生物和酶的问题。

高温淀粉酶在大规模工业生产中有很大的实用性。研究者从热泉中筛选了高效产生高温淀粉酶的嗜热菌,其筛选过程如图所示。

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(1)①过程称为    ,②过程是为了                                                  

(2)Ⅰ号培养基称为    (按功能分);该培养基中除了加入淀粉外,还需加入另一种重要的营养成分   

A.琼脂      B.葡萄糖

C.硝酸铵D.碳酸氢钠

(3)一般对配制的培养基采用高压蒸汽灭菌,其中“高压”是为了                

在高温淀粉酶运用到工业生产前,需对该酶的最佳温度范围进行测定。图中的曲线①表示酶在各种温度下酶活性相对最高酶活性的百分比。将酶在不同温度下保温足够长的时间,再在酶活性最高的温度下测其残余酶活性,由此得到的数据为酶的热稳定性数据,即图中的曲线②。

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(4)根据图中的数据,判断该酶使用的最佳温度范围是   

A.40~50 B.50~60

C.60~70 D.70~80

(5)据图判断下列叙述错误的是   

A.该酶只能在最佳温度范围内测出活性

B.曲线②35 ℃数据点是在80 ℃时测得的

C.曲线①表明80 ℃是该酶活性最高的温度

D.曲线②表明该酶的热稳定性在70 ℃之后急剧下降

 

胡萝卜素是一种常用的食用色素,可从胡萝卜或产胡萝卜素的微生物菌体中提取获得,流程如下:

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(1)筛选产胡萝卜素的酵母菌R时,可选用       或平板划线法接种。采用平板划线法接种时需先灼烧接种环,其目的是   

(2)培养酵母菌R时,培养基中的蔗糖和硝酸盐可分别为酵母菌R的生长提供       

(3)从胡萝卜中提取胡萝卜素时,干燥过程应控制好温度和    以防止胡萝卜素分解;萃取过程中宜采用    方式加热以防止温度过高;萃取液浓缩前需进行过滤,其目的是

(4)纸层析法可用于鉴定所提取的胡萝卜素。鉴定过程中需用胡萝卜素标准品作为   

 

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