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（14分）铁皮石斛是我国名贵中药，生物碱是其有效成分之一，应用组织培养技术培养铁皮石斛拟原球茎（简称PLBs，类似愈伤组织）生产生物碱的实验流程如下：
在固体培养基上，PLBs的重量、生物碱含量随增殖培养时间的变化如图所示，请回答下列问题：
（1）选用新生营养芽为外植体的原因是 ，诱导外植体形成PLBs的过程称_______。（每空1分） （2）与黑暗条件下相比，PLBs在光照条件下生长的优势体现在________ ，_________，__________ 。 （3）脱落酸（ABA）能提高生物碱含量，但会抑制PLBs的生长。若采用液体培养，推测添加适量的ABA可提高生物碱产量。同学们拟开展探究实验验证该推测，在设计实验方案是探讨了以下问题： ①ABA的浓度梯度设置和添加方式：设4个ABA处理组，1个空白对照组，3次重复。因ABA受热易分解，故一定浓度的无菌ABA母液应在各组液体培养基 后按比例加入。 ②实验进程和取样：实验50天完成，每10天取样，将样品（PLBs）称重（g/瓶）后再测定生物碱含量。如初始（第0天）数据已知，实验过程中还需测定的样品数为 。 ③依所测定数据确定适宜的ABA浓度和培养时间：当某3个样品（重复样）的 时，其对应的ABA浓度为适宜浓度，对应的培养时间是适宜培养时间。 【答案】（1）细胞分化程度低，容易诱导形成PLBs 细胞的脱分化 （2）生长起始较快，快速生长时间较长，PLBs产量较高 （3）①灭菌、冷却 ②75 ③PLBs重量和生物碱含量乘积的平均值最大 【解析】 试题分析：（1）根据流程图可知，选用新生营养芽为外植体可获得PLBs，说明新生营养芽细胞分化程度低，容易诱导形成PLBs；诱导外植体形成PLBs的过程称脱分化。 （2）分析曲线图可知，与黑暗条件下相比，PLBs在光照条件下生长的优势体现在生长起始较快、快速生长时间较长、PLBs产量较高等方面。 （3）①由于ABA受热易分解，故一定浓度的无菌ABA母液应在各组液体培养基灭菌、冷却后按比例加入。 ②根据题意，实验50天完成，每10天取样，共取样5次；实验组和空白对照组一共有5组，每组每次均需要取样；为保证数据准确，每组在每次取样时要重复3次并取其平均数；所以如初始（第0天）数据已知，则实验过程中还需测定的样品数为5x5x3=75。 ③依所测定数据确定适宜的ABA浓度和培养时间：当某3个样品（重复样）的PLBs重量和生物碱含量乘积的平均值最大时，其对应的ABA浓度为适宜浓度，对应的培养时间是适宜培养时间。 考点：本题考查植物组织培养及其实验分析，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，能运用所学知识与观点，通过比较、分析与综合等方法对某些生物学问题进行解释、推理，做出合理判断或得出正确结论的能力。 【题型】综合题 （10分）回答下列有关泡菜制作的习题： （1）为了缩短制作泡菜时间，有人会在冷却后的盐水中加入少量陈泡菜液，加入陈泡菜液的目的是 。 （2）泡菜制作过程中，乳酸发酵过程即为乳酸菌进行 的过程。该过程发生在乳酸菌的 中。 （3）泡菜制作过程中影响亚硝酸盐含量的因素有 和 等。对亚硝酸盐的定量测定可以用_____法，因为亚硝酸盐与 的反应产物能与N1萘基乙二胺盐酸盐结合形成______色化合物。 （4）从开始制作到泡菜质量最佳这段时间内，泡菜液逐渐变酸，这段时间内泡菜坛中乳酸菌和其他杂菌的消长规律是 ，原因是 。
【答案】（1）同种限制性核酸内切酶（或同种限制酶） DNA分子杂交 （2）超数排卵 获能 （3）显微注射法 性别鉴定 无性生殖 （4）羊乳中有htPA（或人组织纤溶酶原激活物） 【解析】 试题分析：（1）分析流程图可知，htPA基因与载体用同种限制酶切割后露出血糖的黏性末端，通过DNA连接酶连接，可构建重组表达载体。检测目的基因是否已插入受体细胞DNA，可采用DNA分子杂交技术。 （2）对供体母羊注射促性腺激素，使其超数排卵，可获取更多的卵（母）细胞。采集的精子需要经过获能处理才具备受精能力。 （3）将重组表达载体导入受精卵常用的方法是显微注射法。为了获得母羊，移植前需对已成功转入目的基因的胚胎进行性别鉴定。利用胚胎分割和胚胎移植技术可获得多个转基因个体，该过程的生殖方式是无性生殖。 （4）若检测到转ht-PA基因母羊的羊乳中有htPA，说明目的基因成功表达。 考点：本题考查基因工程和胚胎工程的相关知识，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，形成知识网络的能力。 【题型】综合题 （14分）铁皮石斛是我国名贵中药，生物碱是其有效成分之一，应用组织培养技术培养铁皮石斛拟原球茎（简称PLBs，类似愈伤组织）生产生物碱的实验流程如下：
在固体培养基上，PLBs的重量、生物碱含量随增殖培养时间的变化如图所示，请回答下列问题：
（1）选用新生营养芽为外植体的原因是 ，诱导外植体形成PLBs的过程称_______。（每空1分） （2）与黑暗条件下相比，PLBs在光照条件下生长的优势体现在________ ，_________，__________ 。 （3）脱落酸（ABA）能提高生物碱含量，但会抑制PLBs的生长。若采用液体培养，推测添加适量的ABA可提高生物碱产量。同学们拟开展探究实验验证该推测，在设计实验方案是探讨了以下问题： ①ABA的浓度梯度设置和添加方式：设4个ABA处理组，1个空白对照组，3次重复。因ABA受热易分解，故一定浓度的无菌ABA母液应在各组液体培养基 后按比例加入。 ②实验进程和取样：实验50天完成，每10天取样，将样品（PLBs）称重（g/瓶）后再测定生物碱含量。如初始（第0天）数据已知，实验过程中还需测定的样品数为 。 ③依所测定数据确定适宜的ABA浓度和培养时间：当某3个样品（重复样）的 时，其对应的ABA浓度为适宜浓度，对应的培养时间是适宜培养时间。
（8分）人组织纤溶酶原激活物（htPA）是一种重要的药用蛋白，可在转htPA基因母羊的羊乳中获得。流程如下：
（1）htPA基因与载体用_________切割后，通过DNA连接酶连接，以构建重组表达载体。检测目的基因是否已插入受体细胞DNA，可采用_________技术。 （2）为获取更多的卵（母）细胞，要对供体母羊注射促性腺激素，使其__________。采集的精子需要经过才具备受精能力。 （3）将重组表达载体导入受精卵常用的方法是__________。为了获得母羊，移植前需对已成功转入目的基因的胚胎进行__________。利用胚胎分割和胚胎移植技术可获得多个转基因个体，该过程的生殖方式是__________。 （4）若检测到转ht-PA基因母羊_________，说明目的基因成功表达。
下列关于酶的叙述,正确的是（ ） A.发烧时,食欲减退是因为唾液淀粉酶失去了活性 B.口服多酶片中的胰蛋白酶可在小肠中发挥作用 C.用果胶酶澄清果汁时,温度越高澄清速度越快 D.洗衣时,加少许白醋能增强加酶洗衣粉中酶的活性
如图表示某研究小组在探究果胶酶的用量的实验结果。下列有关说法不正确的是（ ）
A．在AB段限制反应速率的主要因素是酶的用量 B．在BC段限制反应速率的因素是温度、pH、反应物浓度 C．在AC段增加反应物浓度，可以明显加快反应速率 D．在该实验给定条件下，果胶酶的最佳用量是B点对应的值
在大小两个容器内加入等量的乳酸菌和葡萄糖的混合液，然后密封瓶口，过一段时间后进行定量分析，应得到的结果是（ ） A．小容器的乳酸比大容器的多 B．小容器的乳酸比大容器的少 C．大容器的葡萄糖比小容器的少 D．大容器与小容器内的乳酸的量相等
为了防止橘子皮在压榨时滑脱，且出油率高，可采取的措施是（ ） A．加热煮沸 B．漂洗 C．抽滤 D．用石灰水浸泡
下列有关乳酸菌代谢的叙述中，正确的是（ ） A．乳酸菌没有细胞器，只能进行无氧呼吸 B．乳酸菌的蛋白质合成在自身的核糖体上进行 C．乳酸菌的代谢终产物有乳酸和CO2 D．果胶酶可分解乳酸菌的细胞壁中的果胶
下图为苹果酒的发酵装置示意图,下列叙述正确的是（ ）
A.发酵过程中酒精的产生速率越来越快 B.集气管中的气体是酵母菌无氧呼吸产生的 CO2 C.发酵过程中酵母种群呈“J”型增长 D.若发酵液表面出现菌膜,最可能原因是发酵瓶漏气
果汁生产中果胶酶能提高果汁出汁率和澄清度。为了节约成本，某工程人员在适宜的温度和pH下，利用苹果汁和一定浓度的果胶酶溶液探究果胶酶的最适用量，实验结果如图。对实验失误可能的原因分析及改进方法都合理的是（ ）
A．酶促反应时间不合理；延长反应时间 B．苹果汁的用量不合理；减少用量 C．果胶酶用量不合理；减少用量 D．果胶酶体积梯度不合理；增大体积梯度
水稻(基因型为AaBb)的花药通过无菌操作，接入试管，经过一系列过程形成试管苗，以下说法中不正确的是（ ） A．愈伤组织的产生是通过有丝分裂 B．试管苗的基因型是AABB或aabb或AAbb或aaBB C．培养基中要添加有机物 D．用花药离体培养获得的胚状体细胞含1个染色体组
图1、2 分别为“DNA 的粗提取与鉴定实验中部分操作步骤示意图,下列叙述不正确的是（ ）
A.图2 中加入蒸馏水的目的是增大DNA的溶解度 B.图1 中完成过滤之后保留滤液 C.图2 中完成过滤之后弃去滤液 D.在图1 鸡血细胞液中加入少许嫩肉粉有助于去除杂质
下列有关“DNA的粗提取和鉴定”实验原理的叙述，正确的是（ ） A．DNA在NaCl溶液中的溶解度，随NaCl溶液浓度的降低而减小 B．利用DNA不溶于酒精的性质，可除去细胞中溶于酒精的物质而得到较纯的DNA C．DNA是大分子有机物，不溶于水而溶于有机溶剂 D．在沸水中，DNA遇双缩脲试剂会出现紫色反应
提取胡萝卜素和玫瑰精油时都需要加热，但是用萃取法提取胡萝卜素时，采用水浴加热法；而提取玫瑰精油时，可以用直接加热法，其原因是（ ） A．前者需要保持恒温，后者不需要恒温 B．前者容易蒸发，后者不容易蒸发 C．胡萝卜素不耐高温，玫瑰精油耐高温 D．前者烧瓶里含有机溶剂，易燃易爆，后者是水
右图为胡萝卜素的纸层析结果示意图，图中属于标准样品的层析点的是（ ）
A．①② B．③④ C．⑤⑥ D．③④⑤⑥
建设生态农业时巧设、增设食物链的目的不包括（ ） A．努力实现物质的分层分级利用 B．减轻对环境的污染，提高抵抗力稳定性 C．加强生物防治，控制有害生物的危害 D．实现物质和能量的循环，使废物资源化
一个现代牧场的建设不仅要注重不同牧草种类的合理搭配，还要对单位面积内的放牧量进行计算并控制在一定范围内。这种做法体现生态工程所遵循的原理是（ ） A．物质循环再生原理 B．物种多样性原理和协调与平衡原理 C．系统学与工程学原理 D．整体性原理
下列有关胚胎移植的生理学基础的叙述不正确的是（ ） A．哺乳动物排卵后，同种供、受体生殖器官的生理变化是相同的，这是胚胎能够移入受体的生理基础 B．早期胚胎形成后，未与母体子宫建立联系，而是处于游离状态，这是胚胎收集的生理基础 C．受体对移入子宫的外来胚胎基本不发生免疫排斥反应，这是胚胎在受体内能够存活的生理基础 D．供体胚胎可与受体子宫建立正常的生理、组织和遗传上的联系，这是供体胚胎正常发育的生理基础
下列有关哺乳动物受精作用的叙述错误的是（ ） A．刚刚排出的精子要在雌性动物生殖道内发生相应生理变化才能获得受精的能力 B．精子变形过程中线粒体聚集到尾的基部，精子穿越放射冠需要顶体酶 C．卵子在输卵管内发育到减数第二次分裂中期时才具备受精的能力 D．精子触及卵黄膜的瞬间发生卵细胞膜反应
据报道，英国伦敦大学学院医院的医生利用基因诊断和胚胎筛选技术，使得一对拥有乳腺癌家族病史的英国夫妇顺利孕育一名排除乳腺癌隐患的“设计婴儿”。这是英国政府放宽对人体胚胎筛选方面的限制后，首例防止乳腺癌遗传的“设计婴儿”。“设计婴儿”与试管婴儿相比，特有的技术环节是（ ） A．体外受精 B．胚胎移植 C．基因检测 D．细胞核移植
某实验室做了如图所示的实验研究。下列相关叙述，不正确的是（ ）
A．过程④产生的单克隆抗体，不需细胞膜上载体蛋白的协助释放到细胞外 B．与纤维母细胞相比，过程①形成的诱导干细胞的全能性较高 C．过程②是诱导干细胞的结构和遗传物质发生稳定性差异的过程 D．每个Y细胞只产生一种抗体，过程③需用选择性培养基进行筛选
关于哺乳动物的受精和发育，下列叙述正确的是（ ） A．雌性动物排卵后遇精子即完成受精 B．动物卵泡的形成始于初情期 C．动物的个体发育过程：受精卵→卵裂→桑椹胚→嚢胚→原肠胚→幼体 D．胚胎发育至囊胚时开始出现细胞分化，这是由于基因开始进行选择性表达
将经处理后的胚胎干细胞，移植到因胰岛受损而患糖尿病的小白鼠体内后，该鼠血糖浓度趋于正常。上述事实说明（ ） A．该过程体现了胚胎干细胞的全能性 B．移植的细胞中所有基因都得到表达 C．干细胞经处理后进行了定向分化 D．移植的细胞具有无限增殖的能力
2015年2月3日，英国议会下院通过一项历史性法案，允许以医学手段培育“三亲婴儿”。三亲婴儿的培育过程可选用如下技术路线。据图分析，下列叙述错误的是（ ）
A．该技术可避免母亲的线粒体遗传病基因传递给后代 B．捐献者携带的红绿色盲基因不能遗传给三亲婴儿 C．三亲婴儿的染色体全部来自母亲提供的细胞核 D．三亲婴儿的培育还需要早期环胎培养和胚胎移植等技术
关于“克隆羊”“试管羊”“转基因羊”的说法合理的是（ ） A．在培育过程中，都用到了动物细胞培养技术、核移植技术、胚胎移植技术 B．它们的遗传物质都只来自一个亲本 C．它们是通过相同的生殖方式获得的 D．它们在形成过程中，一般都有卵细胞参与
下列有关植物体细胞杂交技术的叙述，错误的是（ ） A．需要在无菌环境条件下，且培养基中需要加入植物激素 B．需要纤维素酶和果胶酶处理以获得原生质体 C．植物体细胞杂交技术的原理是基因重组 D．利用植物体细胞杂交可以获得多倍体植株
在应用农杆菌侵染植物叶片获得转基因植株的常规实验步骤中，不需要的是（ ） A．用携带目的基因的农杆菌侵染植物细胞 B．用选择培养基筛选导入目的基因的细胞 C．用聚乙二醇处理受体细胞 D．用适当比例的生长素和细胞分裂素诱导愈伤组织生芽
下图为基因表达载体模式图，下列相关叙述正确的是（ ）
A．甲表示启动子，位于基因的首端，它是DNA聚合酶识别、结合的部位 B．乙表示终止密码子，位于基因的尾端，作用是使转录过程停止 C．丙表示目的基因，其作用是获得人们所需要的性状 D．复制原点的存在有利于目的基因在宿主细胞中扩增
在一个经长期随机交配形成的自然鼠群中，存在着特殊的毛色遗传。毛色性状由三个复等位基因（A、a1、a2）控制，其中A决定黄色，a1决定灰色，a2决定黑色；A对于a1、a2是显性，a1相对于a2为显性。（注：AA纯合胚胎致死）。请分析回答相关问题。 （1）若亲本基因型为Aa1×Aa2，则其子代的表现型及其比例 。 （2）两只鼠杂交，后代出现三种表现型。则该对亲本的基因型是 ，它们再生一只黑色雄鼠的概率是 。 （3）假设进行很多Aa2×ala2的杂交，平均每窝生8只小鼠。在同样条件下进行许多Aa2×Aa2的杂交，预期每窝平均有 只小鼠致死。 （4）现有一只黄色雄鼠和多只其他各色的雌鼠，如何利用杂交方法检测出该雄鼠的基因型？ 请补充完善实验思路： ①选用该黄色雄鼠与多只 色雌鼠杂交。 ② 。 结果预测： ①如果后代出现黄色和灰色，则该黄色雄鼠的基因型为 。 ②如果后代出现 ，则该黄色雄鼠的基因型为Aa2。
科研人员探究了不同温度（25℃和0.5℃）条件下密闭容器内蓝莓果实的CO2的生成速率的变化，结果见图1和图2。
（1）由图可知，与25℃相比，0.5℃条件下果实的CO2生成速率较低，主要原因是；随着果实储存时间的增加，密闭容器内的 浓度越来越高，抑制了果实的细胞呼吸。该实验还可以通过检测 的浓度变化来计算呼吸速率。 （2）某同学拟验证上述实验结果，设计如下方案：称取两等份同一品种的蓝莓果实，分别装入甲、乙两个容积相同的瓶内，然后密封将甲、乙瓶分别置于25℃和0.5℃的条件下储存，每隔一段时间测定各瓶中的CO2浓度记录实验数据并计算CO2的生成速率。为使试验结果更可靠，请给出两条建议，以完善上述实验方案（不考虑温度因素）。 a. ， b. 。
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